[发明专利]含有2-酮戊二酸脱羧酶基因kgd的工程菌及其用途

权利要求书

1.一种利用糖类碳源生产3-羟基丁酸和4-羟基丁酸共聚酯(P3HB4HB)的工程菌，其特征在于，在所述工程菌的基因组上重组整合有合成P3HB4HB所需的外源基因，该外源基因包括聚-3-羟基丁酸酯合成基因phaCAB、4-羟基丁酰辅酶A：辅酶A转移酶基因orfZ、4-羟基丁酸脱氢酶基因4hbD和2-酮戊二酸脱羧酶基因kgd。

2.权利要求1所述的工程菌，其中所述工程菌的宿主菌可为大肠杆菌野生型，或是大肠杆菌的琥珀酸半缩醛脱氢酶基因突变株。

3.权利要求2所述的工程菌，其中所述工程菌的宿主菌为大肠杆菌的琥珀酸半缩醛脱氢酶基因突变株Escherichia coli JM 109SG。

4.权利要求1-3中任一项所述的工程菌，其中所述外源基因通过重组表达载体整合到所述工程菌的基因组上，所述重组表达载体为pUK70CAB、pUK1624hbdorfZ和pUK81kgd，其中pUK70CAB物理图谱如图1所示，pUK1624hbdorfZ物理图谱如图2所示，pUK81kgd物理图谱如图3所示。

5.权利要求4所述的工程菌，其中用于构建所述重组表达载体的出发载体为pEASY-Blunt和pKD13。

6.权利要求1所述的工程菌，其中糖类碳源为葡萄糖、葡萄糖酸钠、果糖、甘露醇或其组合，或者为经过水解后含有葡萄糖、葡萄糖酸钠、果糖、甘露醇之一或其组合的多糖。

7.一种3-羟基丁酸和4-羟基丁酸共聚酯的生产方法：将权利要求1-5任一项所述的工程菌，在添加糖类碳源的情况下，经过发酵培养得到3-羟基丁酸和4-羟基丁酸共聚酯。

8.权利要求7所述的生产方法，其中所述发酵培养温度为28～38℃。

9.权利要求7-8中任一项所述的生产方法，其中糖类碳源为葡萄糖、葡萄糖酸钠、果糖、甘露醇或其组合，或者为经过水解后含有葡萄糖、葡萄糖酸钠、果糖、甘露醇之一或其组合的多糖。