[发明专利]防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及解淀粉芽孢杆菌及其应用。

背景技术

植物病害是影响农业高产、稳产和优质生产的主要因素之一，每年农业上因病害而造成的损失占到总产值20％左右，每年因病害造成的直接经济损失高达50亿以上，长期以来都是使用化学农药进行防治，但化学农药一直存在着耐药性、污染环境、农药残留、生物多样性降低、人畜毒害等诸多无法克服的弊端。

生物农药由于其对人畜毒性小，环境兼容性好，病虫不易产生抗性等优点而符合现代社会对农业生产及农药的要求，具有广阔的发展空间。绝大多数生产生物农药的菌株是从植物根际土壤微生物中分离筛选得到，由于这些土壤生防菌易受外界环境条件的影响，在与土壤、植物根际或叶围习居微生物的竞争中不易长期定殖并占优势，防病效果不理想，因而极大地影响了它们的实际防病效果。

植物内生细菌是一类次生代谢产物丰富、应用前景广阔的资源微生物，具有在植物体内快速定殖、传导和繁殖功效，许多内生细菌具有固氮、促生、抗旱、防病等生物学功能，内生细菌作为潜在的生防资源，可以弥补土壤来源的生防菌田间防效不稳定的缺陷，是最具发展潜能的新型生防菌株。

发明内容

本发明提供防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌及其应用。

防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌，它为防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌TF28，为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens，属于芽孢杆菌属(Bacillus)，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.4038，保藏日期为2010年7月26日；防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌TF28为革兰氏阳性好氧菌，为杆状，长为1.5μm～2.5μm，宽为0.5μm～1.5μm，内生芽孢，无鞭毛；在牛肉膏蛋白胨培养基上形成乳白色菌落，皱褶，边缘不整齐，菌落中心突起呈脊状。

本发明中防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌TF28葡萄糖发酵试样阳性、淀粉水解试验阳性、明胶液化试验阳性、V.P反应阳性、接触酶反应阳性、甲基红反应阳性、硝酸盐还原试验阳性、柠檬酸盐利用阳性、好养生长、生长pH值为6.5～8.5，生长温度为30～37℃。

本发明中防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌，菌株号为TF28，为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens，属于芽孢杆菌属(Bacillus)，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.4038，保藏日期为2010年7月26日。

防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌的应用：一、取-70℃冷冻保存的防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌TF28的菌液，划线接种于LB固体培养基上，30℃恒温箱中培养18～20h，挑取单菌落接种于5ml的LB液体培养基中，30℃震荡培养18～20h，得到活化菌液；二：按2％～5％接种量将活化菌液接种于装有100ml NYD培养液的500ml三角瓶中，30℃培养32～50h，转速为150～250r/min，发酵结束菌液浓度达到20～40亿/ml，即为防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌TF28菌株发酵液；三、待防治的种子预先用水浸泡5～7d，再浸泡于防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌TF28菌株发酵液的50倍稀释液中2d即完成种子的防病。

本发明防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌TF28，是从大豆根部分离的对大豆根腐病、水稻恶苗病等多种植物病原真菌具有较高防效的生防菌株，具有在大豆、水稻等多种作物根部定殖能力，是一株极具有开发应用价值的生防菌株。

本发明中菌株TF28能在植物体内定殖、繁殖和传导，该菌株可以同时产生抗菌蛋白和脂肽类抗生素两种抗菌物质，具有防病促生、增产提质、抑菌谱广等多重功效；

本发明防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌的应用中，制剂生产成本低廉，操作简单，易于实施，可批量生产和推广应用；菌株TF28的菌剂有利于保护农田生态环境，减少农药残留，适合于我国无公害农产品生产的要求；采用菌株TF28发酵液的50倍稀释液处理水稻种子，对水稻恶苗病温室防效达到84.6％以上，同时，对三种大豆根腐病菌(镰刀菌根腐病、腐霉根腐病和疫霉根腐病)、黄瓜枯萎病菌、甜瓜枯萎病菌、西瓜枯萎病菌、番茄灰霉病菌、辣椒早疫病菌、大豆菌核病菌、黄瓜立枯病菌、水稻恶苗病菌、水稻稻瘟病菌均具有较强抑制作用。

具体实施方式