[发明专利]全二维超高压高效液相色谱分离系统

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱分离系统，具体地说是一种超高压快速液相色谱为第二维的全二维高效液相色谱分离系统。

背景技术

随着现代生命科学、食品安全、环境监测以及医疗卫生的发展，复杂样品体系的分离成为分析化学研究的重要方向。与一维色谱相比，多维色谱技术大大提高了整个分离系统的峰容量和分离选择性，成为复杂体系分离分析的研究热点。多维液相色谱是将样品的第一维色谱柱的洗脱液依次注入后续维的色谱柱进行进一步分离的液相色谱联用技术。这种分离技术利用两种或两种以上不同分离机理的色谱柱进行样品的正交分离。传统的二维液相色谱是采用中心切割技术，只对第一维洗脱产物中感兴趣的组分进行切割，收集后再进入第二个模式的色谱柱分析，这种技术不能得到第一维洗脱产物全部组分的信息，同时收集再进样容易造成样品的污染和浪费，而且分析时间较长。与此相比，全二维液相色谱(Comprehensive Two Dimensional Liquid Chromatography)克服了中心切割技术的弊端，使一维洗脱产物全部进入到第二维模式中继续分析，同时也实现了在线分析和自动化操作将分离机理不同的色谱柱组合在一起，实现样品的分离。

全二维液相色谱由采用不同分离机理色谱柱的一维分离系统通过一定的切换模式结合而成，切换阀是常见的切换模式，通常有3种接口形式：1.样品存储环切换，2.捕集柱切换，3.平行柱交替切换。对于样品存储环切换技术，存储环的切换周期就是第二维色谱的分离时间。对于全二维色谱，为了使存储环的体积与第二维色谱的分离时间匹配，通常采取减小第一维流速和加快第二维色谱分离的方法。目前主要采用整体柱为第二维柱，加快第二维的分离时间，但是，由于整体柱流速过大，会造成后续进样样品的稀释，降低样品检测灵敏度。然而，目前细颗粒的超高压液相色谱柱可以在相对较低流速和不损失柱效的情况下实现快速分离，所以超高压液相色谱非常适合作为全二维液相色谱的第二维。而且，二维分离的时间主要由第二维色谱分离的时间决定。如果采用短柱超高压液相色谱作为第二维色谱柱，那么第二维的分析时间大大缩短，第一维的柱流出物切割到第二维柱的周期相应缩短，不仅可以避免第一维的分离度在第二维上的损失，而且可以大大加快二维色谱系统的分析时间。

常规液相色谱泵耐受压力为400bar，与之匹配的切换阀耐受压力为400bar，由于超高压切换阀(耐受压力为600bar)的商品化，使用超高压液相色谱泵和细粒径超高压色谱短柱作为全二维液相色谱的第二维可以实现二维色谱的快速有效分离。

发明内容

本发明的目的正是基于上述现有技术的状况而提供一种全二维液相色谱分离系统，通过超高压液相色谱溶剂输送泵、超高压十通阀和超高压液相色谱柱的引入，实现第二维色谱的快速分离，满足全二维色谱对第二维色谱分离速度的要求，实现全二维液相色谱分离系统的超强分离能力。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：本发明的全二维超高压高效液相色谱分离系统，包括液相色谱溶剂输送泵、液相色谱柱和定量环、二位十通阀、检测器及进样器构成，其中：液相色谱溶剂输送泵有两个：一个为常规高压液相色谱溶剂二元泵，另一个为超高压液相色谱溶剂二元泵；液相色谱柱有两个：一个为常规高压液相色谱柱，另一个为超高压液相色谱柱；常规高压液相色谱溶剂二元泵输出端通过进样器与二位十通阀的④位相连，超高压液相色谱溶剂二元泵输出端与二位十通阀的②位相连，超高压液相色谱柱输入端连接于二位十通阀的⑦位，输出端与检测器相连，在二位十通阀的⑤位和⑧位之间、③位和⑩位之间分别连接有定量环，二位十通阀的①位和⑥位之间通过管线连通，二位十通阀的⑨位为废液口。

在本发明中，所述常规高压液相色谱柱为第一维色谱柱，可以是正相色谱柱或反相色谱柱中的任意一种，为内径1mm，柱长25cm的窄径长柱。所述超高压液相色谱柱为第二维色谱柱，是反相色谱柱，粒径为1.8μm或2.7μm，柱长为50mm的短柱。二位十通阀为超高压二位十通阀。

本发明的分离过程主要是将第一维色谱柱的流出液存储于十通阀的定量环，再通过十通阀切换到第二维色谱柱上，实现进一步分离后进入检测器检测。

本发明的特点在于：