[发明专利]β-兴奋剂莱克多巴胺、沙丁胺醇二元检测测试条及其制备方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种β-兴奋剂莱克多巴胺、沙丁胺醇二元检测测试条及其制备方法。

二、背景技术

β-兴奋剂是一类拟肾上腺素，因其能使动物和人体组织中的β受体兴奋(激动)从而调节体内不同组织的机能而得名，其化学成分为苯乙醇胺衍生物，该类药物具有促进畜禽脂肪分解、增加肌肉生长作用，作为营养重分配剂，以提高瘦肉率，减少脂肪沉积和促进动物生长，被一些畜牧养殖者作为养殖促进剂非法使用。在养殖业中最常用的是盐酸克仑特罗(Clenbuterol)、沙丁胺醇(Salbutamol)和莱克多巴胺(ractopamine)，在家畜饲料中使用β-兴奋剂而造成消费者食物中毒事件时有发生。β-兴奋剂作为促进动物生长、提高瘦肉率的饲料添加剂，但长期使用会使该类药物在动物食品中蓄积，人食用了饲喂含β-兴奋剂作为添加剂饲料的畜产品后，就会出现中毒症状，通常会出现肌肉震颤、心悸、精神紧张、头疼、肌肉疼痛、晕眩、恶心、呕吐、发烧、战栗等症状，甚至死亡。因此，世界许多国家禁止在饲料中使用盐酸克伦特罗等β-兴奋剂来增加动物的瘦肉率。我国政府已明令禁止在畜牧生产中使用盐酸克伦特罗等β-兴奋剂。

目前，现有技术对于盐酸克仑特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的检测主要依赖化学仪器分析、酶免疫检测试剂盒及单独检测盐酸克仑特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的检测测试条。监管部门并不知道养殖户使用了何种β兴奋剂，检测存在一定的盲目性，常常造成漏检。因此，市场迫切需要有一种试剂能同时检测常见的β兴奋剂，以方便日常监管工作。

三、发明内容

针对上述情况，为克服现有技术缺陷，本发明目的在于提供一种能快速、简便地同时检测出β-兴奋剂莱克多巴胺、沙丁胺醇二元检测测试条及其制备方法，为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：包括基材PVC板和覆膜，基材PVC板上面自后向前依次设置有引水玻璃纤维、载体玻璃纤维、硝酸纤维膜和吸水棉浆板，引水玻璃纤维、载体玻璃纤维和吸水棉浆板上面覆盖有由前部覆盖膜和后部覆盖膜组成的覆膜，载体玻璃纤维内吸附有抗莱克多巴胺蛋白质偶联物单克隆抗体和抗沙丁胺醇蛋白质偶联物单克隆抗体胶体金标记物，硝酸纤维膜上包被有一条质控线和两条测试线，质控线包被有兔抗鼠多抗(为公知市售产品，如郑州兰森生物技术有限公司的产品)，测试线包被有莱克多巴胺蛋白质偶联物、沙丁胺醇蛋白质偶联物；硝酸纤维膜两端分别与载体玻璃纤维后端面和吸水棉浆板前端面紧密接触，载体玻璃纤维前端面和引水玻璃纤维后端面紧密接触；其制备方法是，由以下步骤实现：首先分别制备胶体金标记单克隆抗体、胶体金溶液、胶体金标记物、固化金标物、包被膜，再将上述制备好的包被膜、固化金标物、引水玻璃纤维、吸水棉浆板固定粘结于基材PVC板上，覆盖上覆膜，切割成长条即可。

本发明可有效用于同时检测β-兴奋剂莱克多巴胺、沙丁胺醇，本发明测试条在使用时，将引水玻璃纤维(膜)一端竖向插入标本样品中，或将标本样品滴至测试条前部引水玻璃纤维上，样品在毛细作用下，沿测试条向后部吸水棉浆板方向泳动，如果标本样品中含有β-兴奋剂莱克多巴胺和沙丁胺醇或一种，它们与相应标记抗体(胶体金标记单克隆抗体)反应形成标记抗体-抗原复合物；当标本样品泳动至包被有莱克多巴胺蛋白质偶联物、沙丁胺醇蛋白质偶联物检测带时则不发生反应，而与质控线反应，结果仅出现一条红线(质控线)或两条红线；如果标本样品中无β-兴奋剂莱克多巴胺和沙丁胺醇，标记抗体(抗沙丁胺醇蛋白质偶联物单克隆抗体或抗莱克多巴胺蛋白质偶联物单克隆抗体)分别与包被膜上莱克多巴胺蛋白质偶联物、沙丁胺醇蛋白质偶联物以及质控线结合形成红色线条带，结果出现n+1条红线；如质控线不出现红线，则表明测试条已失效。因此，利用本测试条，只需一次加样，5～10分钟即可对二种β-兴奋剂进行检测。该方法简单、方便、快捷、结果准确。

四、附图说明

附图为本发明测试条立体结构图(覆膜掀起)。

五、具体实施方式

以下结合附图对本发明的具体实施方式作详细说明。