[发明专利]一种接骨续筋片的检测方法

权利要求书

1.一种接骨续筋片的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：采用薄层色谱法鉴别骨碎补，高效液相色谱法测定薯蓣皂苷元的含量。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述鉴别方法包括以下步骤：

(1)取本品3片，除去糖衣，研细，加甲醇6ml，温浸30分钟，滤过，取滤液2ml，加对二甲氨基苯甲醛溶液2ml，密闭，置60℃水浴中加热30分钟，显粉红色；

(2)取本品1片，除去糖衣，研细，加水5ml，置水浴中加热10分钟，滤过，取滤液1ml，加茚三酮试液0.5ml，置水浴中加热，显蓝紫色；

(3)取本品10片，去糖衣，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取骨碎补对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照《中国药典》2005版一部附录Ⅵ B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比1∶12∶2.5∶3甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品相应位置显相同颜色的荧光斑点。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述含量测定方法包括以下步骤：

照中国药典2005年版一部附录VI D高相液相色谱法测定

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：以体积比90∶10乙腈-水为流动相；检测波长为203nm，理论板数按薯蓣皂苷元峰计应不低于3000，

对照品溶液的制备  取薯蓣皂苷元对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得，

供试品溶液的制备  取本品20片，除去糖衣，研细，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置具塞锥形瓶中，蒸干，残渣加3mol/L盐酸溶液20ml使溶解，加热回流1小时，取出，放冷，用三氯甲烷振摇提取3次，每次25ml，合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣加流动相使溶解并转移至25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得，

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，

本品每片含穿山龙以薯蓣皂苷元(C₂₇H₄₂O₃)计，为0.56mg。

4.一种接骨续筋片的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

【鉴别】(1)取本品3片，除去糖衣，研细，加甲醇6ml，温浸30分钟，滤过，取滤液2ml，加对二甲氨基苯甲醛溶液2ml，密闭，置60℃水浴中加热30分钟，显粉红色，

(2)取本品1片，除去糖衣，研细，加水5ml，置水浴中加热10分钟，滤过，取滤液1ml，加茚三酮试液0.5ml，置水浴中加热，显蓝紫色，

(3)取本品10片，去糖衣，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取骨碎补对照药材1g，同法制成对照药材溶液，再取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水(1∶12∶2.5∶3)的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品相应位置显相同颜色的荧光斑点，

【检查】应符合合剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IJ)，

【含量测定】照高相液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定，

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：乙腈-水(90∶10)为流动相；检测波长为203nm，理论板数按薯蓣皂苷元峰计应不低于3000，

对照品溶液的制备  取薯蓣皂苷元对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得，

供试品溶液的制备  取本品20片，除去糖衣，研细，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置具塞锥形瓶中，蒸干，残渣加3mol/L盐酸溶液20ml使溶解，加热回流1小时，取出，放冷，用三氯甲烷振摇提取3次，每次25ml，合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣加流动相使溶解并转移至25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得，

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，

本品每片(每素片重0.32g)含穿山龙以薯蓣皂苷元(C₂₇H₄₂O₃)计，为0.56mg。