[发明专利]三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物中间体的分离提纯方法，尤其是一种利用三带模拟移动床色谱分离芍药苷的方法。

背景技术

芍药苷具有镇静、扩张血管、抗血栓形成及解痉的药理作用，它是白芍总苷提取物中的主要成分，是从中药白芍中提取得到的。但是，由于在白芍总苷提取物中，除了有芍药苷以外，还有芍药内酯苷、羟基芍药苷、苯甲酰芍药苷等多种苷类组分，以及如苯甲酸、儿茶素等其他多种组分，因此在芍药苷的制备过程中，关键的步骤就是对其分离提纯，目前对芍药苷的分离提纯方法主要是大孔吸附树脂法、硅胶柱层析法及凝胶柱层析等方法，以上这些方法不但生产效率低、成本高、产量低，而且都无法进行高纯度的规模化分离，无法满足实际生产的需求。

采用模拟移动床色谱分离药物中间体的方法，近年来已有很多报道。查阅专利文献，与本发明相关的是宁波立华植物提取技术有限公司申请的中国专利，名称为“模拟移动床色谱法分离制备芍药内酯苷的方法”，公开(公告)号：CN101607975。该申请采用白芍总苷为原料，应用模拟移动床色谱法分离制备芍药内酯苷，流动相采用甲醇或乙腈与水、甲酸、异丙醇的混合溶液。芍药内酯苷产品的纯度达到90％以上。采用的是四带的模拟移动床色谱，为了调整峰型，流动相中加入了甲酸和异丙醇。萃余液出口可获得较高纯度得芍药苷。该申请由于添加了甲酸和异丙醇，造成了溶剂回收利用较难，浪费了溶剂，并且没有具体指出得到的芍药苷的纯度。另外，四带模拟移动床色谱各流量之间的牵引作用较大，流量不易控制，同时四带模拟移动床色谱冲洗液和流动相一致，冲洗液流量无法根据吸附组分的情况而变化，灵活性较差。

发明内容

本发明提供了一种三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法，解决芍药苷的分离提取纯度低，无法规模化生产的问题。

本发明采用的技术方案如下：

三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法，该方法采用白芍总苷提取物为原料，应用三带模拟移动床色谱系统分离提纯，三带模拟移动床色谱系统由4～8根色谱柱组成，色谱柱分为三个带：解吸带；精制带；吸附带，每个带由1～4根相同的色谱柱串联构成，系统工作条件是：进样液流速U_F为0.1～2.5mL/min；洗脱液流速U_D为5～40mL/min；萃取液流速U_E为2～20mL/min；萃余液流速U_R为2～20mL/min；固定相采用十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为甲醇与水的混合溶液；切换时间T_S为15～30min；操作温度为15～40℃。

上述流动相甲醇与水的混合溶液体积比比例为25∶75。

上述的白芍总苷提取物采用纯化手段从白芍药材中提取得到，白芍总苷提取物中的芍药苷和芍药内酯苷的总含量的质量百分比大于95％，其中芍药苷的含量的质量百分比大于45％。

上述进入三带模拟移动床色谱分离提纯的白芍总苷提取物原料采用纯甲醇溶解，溶解后白芍总苷提取物的浓度为30～300mg/mL。

本发明与现有技术相比，其显著的有益效果体现在：

采用三带模拟移动床色谱系统分离提纯的芍药苷产品的质量百分比纯度达到95％以上，同时获得的芍药内酯苷的质量百分比纯度达到90％以上。由于三带模拟移动床系统分离过程是连续分离过程，生产的自动化程度高，生产效率高，且溶剂只使用了甲醇和水，可以回收利用，节约资源，分离过程中不接触有毒溶剂，真正实现了清洁生产。

附图说明

图1为本发明三带模拟移动床色谱系统的流路图；

图2为本发明芍药苷产品的HPLC图谱。

具体实施方式

下面结合附图用实施例对本发明作具体说明：

1.原料溶液的配制

通过乙醇回流提取和大孔吸附树脂层析分离，从白芍饮片中制得芍药苷和芍药内酯苷质量百分比总含量大于95％，其中芍药苷的质量百分比含量大于45％的白芍总苷提取物。将得到的提取物溶解于纯甲醇中，沉降，经0.45μm滤膜过滤得到浓度为100mg/mL的溶液，作为三带模拟移动床色谱系统的进样溶液。此过程可以去除大部分杂质，减少了三带模拟移动床色谱系统设备中色谱柱的污染，延长了色谱柱的使用寿命。

2.色谱柱的装填与流动相的组成

使用匀浆法填装8根色谱柱，色谱柱规格50mm×100mm，填料为十八烷基硅烷键合硅胶，粒径为20～40μm。经过匀浆法装填后的色谱柱对称性要求一致，以萘和尿嘧啶为考察物柱效为800以上。