[发明专利]甘蔗黑穗病菌快速检测方法

权利要求书

1.一种甘蔗黑穗病菌快速检测方法，其特征是：在甘蔗黑穗病病发的甘蔗植株中提取分离获得甘蔗黑穗病菌，对甘蔗外表面进行的无菌处理，在分离真菌的马丁氏培养基中筛选获得单孢菌落，取单孢菌落于马铃薯液体培养基中培养得到大量的病原菌；通过CTAB法提取甘蔗黑穗病菌的基因组DNA，以真菌核糖体基因转录间隔区ITS的通用引物ITS3和ITS4，扩增真菌的核糖体转录间隔区中的一段，目的片段大小480bp，若能扩增获得480bp的目的片段，则初步证明分离获得了甘蔗黑穗病菌，对PCR产物进行测序则进一步证明分离获得了甘蔗黑穗病菌。

2.根据权利要求1所述的甘蔗黑穗病菌快速检测方法，其特征是：从田间取回尚未破出叶鞘的黑穗病甘蔗植株顶端部分，取其顶端30-40cm长的一段作为材料。

3.根据权利要求1或2所述的甘蔗黑穗病菌快速检测方法，其特征是：将材料置于干净的牛皮纸袋子中在太阳下晒或在60度的烘箱中烤6个小时左右；在超净工作台中，利用75％的乙醇对甘蔗茎干进行表面除菌后，剥开两片甘蔗叶鞘，在无菌报纸上横向切开甘蔗，用接种针挑取横切面中的黑色冬孢子，采用弹射接种法将一次挑取的黑粉接种于多个马丁氏培养基中，经28℃黑暗培养约两天，得到甘蔗黑穗病的单孢菌落。

4.根据权利要求1所述的甘蔗黑穗病菌快速检测方法，其特征是：在马丁氏培养基上获得纯白色菌丝，密生，初步认为分离物是甘蔗黑穗病菌，利用马铃薯液体培养基培养获得大量的甘蔗黑穗病菌。