[发明专利]朝药万年蒿抗癌有效部位及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及朝药万年蒿(菊科蒿属Artemisia sacrorum Ledeb.)地上部分抗癌有效部位及其制备方法。

背景技术

癌症是人类死亡的最主要因素之一。根据世界卫生组织的报告，2000年全球新发癌症病人1010万人，死亡620万人，现患癌症病例2440万。无论在发达或发展中国家，癌症发病率和死亡率在世界范围均呈上升趋势，近20年多年来，全球癌症发病率增长了22％，其发病年龄趋于下降，癌症正在超过心脑血管疾病将成为死亡原因的第一位。2000年，我国癌症发病人数约180-200万，占世界发病总数的五分之一，死亡人数140-150万，占世界死亡总数的四分之一。

菊科蒿属植物，广泛应用于治疗肝炎，癌症，疟疾及细菌、病毒等引起的感染性疾病。据文献报道，在目前研究的蒿类中，经过体内、体外实验证明，奇蒿，青蒿，茵陈蒿，艾蒿等，有潜在的抗癌作用。其中对青蒿的研究最多而成果也最有明显。由青蒿中提取得到的青蒿素(一种倍半萜内酯)经体内外实验表明，青蒿素及其衍生物对多种动物和人体肿瘤细胞具有确切的抗肿瘤作用，其作用机制是多方面的。有望成为新的广谱、高效、低毒的抗癌药物。万年蒿，拉丁名为Artemisia sacrorum Ledeb，以地上部分入药，在我国吉林省延边地区长期被朝鲜族当做民族药材用于治疗各种肝炎症状如肝硬化、黄疸等，被称为朝药。近年来对万年蒿抗肝损伤的药理活性和作用机理进行了研究并得到了一定的成果，其保肝作用等到了充分的认识和验证。同时，万年蒿与青蒿同属蒿类植物，含有许多结构相似的化学成分如香豆素、萜类及黄酮类等，因此有必要对万年蒿进行抗肿瘤活性筛选和化学成分研究。

目前对朝药菊科蒿属植物万年蒿抗肿瘤有效部位的研究极少，无法满足一些产品研发和生产的需要。

发明内容

本发明提供了一种从万年蒿中分离、纯化抗癌有效部位的方法。

本发明方法具体优选如下步骤：

(1)提取。在6至10月份万年蒿的地上部分，阴干备用。将万年蒿的地上部分粉碎，加5至20倍30-100％乙醇浸泡过夜，第二天以适当浓度的乙醇为提取溶剂回流提取；加热回流提取三次，温度为50至100℃，每次分别为3h，2h，和2h。

(2)过滤。趁热应用滤纸、医用棉花过滤回流提取液，合并过滤液。

(3)萃取。合并后减压浓缩得到乙醇浸膏。浸膏中加入水成混悬液后依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇等化学试剂进行萃取，每种化学试剂萃取3至10次，合并萃取液。

(4)干燥。二氯甲烷萃取物经过喷雾浓缩、干燥即为万年蒿抗癌有效部位。

以下结合实施例对本发明的具体实施方式加以说明。但本发明的保护范围不能认为只局限于下述具体实施方式及具体实例。对所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的基本前提下，还可以做出若干简单推演或等同替换，这些等同替换方案仍然将被视为在本发明的保护范围之内。

具体实施方式

实施例1

2.1.1万年蒿的提取与分离(Ⅰ)

干燥好的万年蒿粉碎成小块(共1000g)，分两部分。每部分(500g)加3000ml50％乙醇浸泡过夜，分别回流3h，2h和2h提取。提取液趁热过滤，减压浓缩得到乙醇浸膏178.42g(ethanol extract)。浸膏中加入水成混悬液后依次用石油醚(petroleum ether，PE，3×1L)、二氯甲烷(dichloromethane，CH₂Cl₂，3×1L)、正丁醇n-butanol(n-BuOH，3×1L)等进行萃取。各萃取物分别减压浓缩溶剂后得到石油醚萃取物(PE)11.3g，二氯甲烷萃取物(CH₂Cl₂)17.2g，正丁醇萃取物(n-BuOH)52.8g等。

2.1.2化合物的提取与分离(Ⅱ)

万年蒿的地上部分用水提取三次，分别为2h，1h，1h。水提取液浓缩后上样于D-101大孔吸附树脂柱层析，并且分别以水，50％乙醇，95％乙醇洗涤。50％乙醇洗脱液(50％EE)经放置过夜，再分成2个部分：50％乙醇洗脱液沉淀部分(50％EEP)和50％乙醇洗脱液上清液部分(50％EES)。

因此得到水洗脱液(WEWE)，50％乙醇洗脱液(50％EE)和95％乙醇洗脱液(95％EE)。