[发明专利]一种基于Tgf2转座子的鱼类基因转移载体及其制备方法无效
| 申请号： | 201010223174.6 | 申请日： | 2010-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN101962659A | 公开（公告）日： | 2011-02-02 |
| 发明（设计）人： | 邹曙明;蒋霞云;杜雪地;沈睿杰;袁剑 | 申请（专利权）人： | 上海海洋大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/66 |
| 代理公司： | 上海天翔知识产权代理有限公司 31224 | 代理人： | 陈学雯 |
| 地址： | 201306 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 tgf2 座子 鱼类 基因 转移 载体 及其 制备 方法 | ||
1.一种基于Tgf2转座子的鱼类基因转移载体，其特征在于，包括Tgf2转座子转基因供体质粒和表达Tgf2转座酶的辅助质粒。
2.根据权利要求1所述的鱼类基因转移载体，其特征在于，所述Tgf2转座子转基因供体质粒包括：Tgf2转座子包含反向重复序列的左右臂序列和鱼类特异性表达蛋白的调控元件。
3.根据权利要求1所述的鱼类基因转移载体，其特征在于，所述辅助质粒在鱼类特异性表达蛋白的调控元件指导下表达Tgf2转座酶。
4.根据权利要求2或3所述的鱼类基因转移载体，其特征在于，所述Tgf2转座子的左右臂序列及转座酶选自金鱼。
5.根据权利要求2所述的鱼类基因转移载体，其特征在于，所述供体质粒的鱼类特异性表达蛋白的调控元件为斑马鱼krt8启动子序列。
6.根据权利要求3所述的鱼类基因转移载体，其特征在于，所述辅助质粒的鱼类特异性表达蛋白的调控元件为斑马鱼β-actin启动子序列。
7.一种如权利要求1基于Tgf2转座子的鱼类基因转移载体的制备方法，包括以下步骤：
(1)鱼类Tgf2转座子转基因供体质粒的构建：运用PCR技术，分别克隆斑马鱼krt8启动子序列；构建目的基因表达盒；通过基因克隆技术将上述构建的包含启动子和目的基因表达盒克隆入Tgf2转座子的左右臂序列所包含反向重复序列之间，构建鱼类Tgf2转座子转基因供体质粒；
(2)鱼类Tgf2转座酶辅助质粒的构建：将斑马鱼β-actin启动子序列和Tgf2转座酶编码基因连接，构建能表达转座酶的辅助质粒。
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