[发明专利](R，S)-告依春中表告依春和S-告依春的分离方法

说明书

技术领域

本发明提供一种从(R，S)-告依春化合物中分离表告依春及其对映异构体化合物的方法，即，一种表告依春及其对映体S-告依春的制备分离方法，尤其是表告依春及其对映体S-告依春的制备提纯方法。

背景技术

表告依春(R-告依春)和S-告依春为含硫生物碱，互为对映异构体，均可由十字花科植物中提取。发明专利申请200410016902.0提供了从板蓝根中提取表告依春的方法及其用途。但在采用200410016902.0方法提取的表告依春，经更加权威和精密的手性分析结果显示，实际上其为表告依春和S-告依春的混合物，并非该专利申请文本所披露的单一物质表告依春。

由于表告依春和S-告依春的活性具有较大差异，且目前还没有对(R，S)-告依春或者板蓝根中提取的表告依春进行手性分离纯化的工艺。本领域迫切需要一种制备光学纯的表告依春的方法以及对表告依春和S-告依春进行手性分离和分析的方法，目的是可以得到表告依春及其对映体单体，使得到的单体可以直接用于各种含量测定。

发明内容

本发明经过大量的实验，研制出一种可以一次性成功地制备分析出表告依春及其对映体的方法，该方法简单、高效，分离度高，单体纯度高。

本发明目的在于提供一种提取分离出表告依春及其对映体的方法。

本发明提供了一种表告依春及其对映体的制备方法，该对映体为S-告依春，其特征在于，该方法其实是表告依春(epigoitrin)及其对映体S-告依春(goitrin)的手性分离方法，该方法包括：

(1)、将(R，S)-告依春加溶剂，所述溶剂选自水、乙醇、甲醇、三氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、正己烷、二甲苯、吡啶、二甲基亚砜或其混合，制成(R，S)-告依春溶液；

(2)、取上述(R，S)-告依春溶液，采用高效液相色谱法进行手性分离，该高效液相色谱法的固定相为多糖衍生物类手性色谱柱，流动相为正己烷-异丙醇或正己烷-乙酸乙酯或正己烷-异丙醇-二乙胺或正己烷-乙酸乙酯-二乙胺，检测器为紫外检测器；收集流份，根据出峰顺序该流份分别为表告依春和S-告依春。

需要指出的是：流动相中是否有乙酸乙酯，两个化合物的出峰顺序不一样：有乙酸乙酯的流动相，S-告依春先出峰；无乙酸乙酯的流动相，表告依春先出峰。

本发明的上述方法得到的表告依春及其对映体S-告依春经过分析测试为光学纯的表告依春和S-告依春。

本发明的制备分离方法中，步骤(1)流动相中以正己烷与异丙醇或正己烷与乙酸乙酯为主要成分，二者体积比为90∶5～90∶40，即，以该二成分体积之和为100份做基准，正己烷占60～95份，异丙醇或乙酸乙酯占5～40份；此外，为了峰形和谱图更加美观易读取相关信息等原因，还可以在上述二组分的基础上增加二乙胺，以该二主要成分体积之和为100份做基准，二乙胺所占的体积比为0.05～0.2份。本发明流动相的组分比例均为体积比。

上述的制备分离方法，其中，步骤(1)中所述的(R，S)-告依春溶液的浓度在0.1mg/ml～饱和溶液浓度之间，该饱和溶液浓度为(R，S)-告依春在所采用的溶剂中的饱和浓度，一般可在0.1～10mg/ml之间；例如，所采用的溶剂优选为二甲苯，制成(R，S)-告依春的溶液的浓度一般约为5mg/ml。

本发明的方法采用的液相色谱法的流动相优选为正己烷-乙酸乙酯-二乙胺；以正己烷和乙酸乙酯的体积之和为100份做基准，所述的正己烷占60～90份，乙酸乙酯占10～40份，正己烷和乙酸乙酯之和与二乙胺的比例为0.05～0.2∶100。

本发明的方法采用的液相色谱法的紫外检测器的检测波长为235～255nm，优选为245nm左右。

在本发明的具体实施例中，优选二甲苯作为溶剂。取(R，S)-告依春适量，加二甲苯制成浓度约为5mg/ml的溶液。

本发明提供的(R，S)-告依春中表告依春及其对映异构体的制备分离方法，所述的对映异构体为S-告依春，该方法包括：

1、取(R，S)-告依春适量，加溶剂制成溶液，该溶剂选自水、乙醇、甲醇、三氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、正己烷、二甲苯、吡啶、二甲基亚砜或以上溶剂的混合。该溶液的浓度可在0.1mg/ml～饱和溶液之间调节，一般浓度为1～10mg/ml。