[发明专利]一种酶法提取白芍中芍药苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药有效成分提取技术领域，具体涉及一种酶法提取白芍中芍药苷的方法。

背景技术

白芍是毛茛科植物芍药(PaeonialactifloraPall)的干燥根，主要活性成分为芍药苷。《中国药典》2000年版一部记载白芍具有养血柔肝，缓中止痛，敛阴收汗之功效。是宋代经典名方四物汤(熟地黄、当归、白芍、川芎)中的主药之一，白芍的主要有效成分为芍药苷(paeoniflorin)、芍药内酯苷(albiforin)、羟基芍药苷(oxypaeoniflorin)、苯甲酰芍药苷(benzoylpaeoniflorin)和苯甲酰羟基芍药苷(benzoyloxypaeoniflorin)等单萜苷类化合物，简称芍药总苷，其中芍药苷(Paeoniflorin)约占70%以上。

现代药理学研究表明，芍药苷具有抗炎、镇痛、抗惊厥和免疫调节等作用，临床应用广泛，疗效确切，同时其还具有扩张冠状动脉，增加冠脉流量，对抗急性心肌缺血，抑制血小板凝聚及降低血压等药理作用，而目前芍药苷提取方法是：白芍原料经粉碎后用甲醇、乙醇、水或含水醇溶液回流提取，浓缩回收醇后，将浓缩膏悬浮于水中，采用大孔树脂吸附，再经醇溶液洗脱，洗脱液浓缩后得到芍药苷（Paeoniflorin），然而此种方法存在的问题是：流程长，溶剂耗量大，温度高，收率低(2.0%左右)。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种酶法提取白芍中芍药苷的方法，以白芍为原料，采用酶法进行提取、分离，以克服现有技术存在的流程长，溶剂耗量大，温度高，收率低的问题。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种酶法提取白芍中芍药苷的方法，依次包括下述步骤，

(1)提取：

将白芍原料粉碎，溶于水中（固液比1:3～1:10），在35-60℃，pH4-7条件下，添加纤维素酶5-50u/g，果胶酶5-50u/g，处理1-3h；

(2)离心分离：

将酶解液放入离心机，5000rpm离心分离20min，取上清液；

(3)吸附：

将所得上清液浓缩过滤，上大孔吸附树脂，先用水洗脱，再用70%乙醇洗脱，收集3倍柱体积乙醇洗脱液；

(4)浓缩：

将收集的乙醇洗脱液减压浓缩并回收乙醇；

(5)真空干燥：

将浓缩浸膏置于60℃真空干燥箱中，干燥12h，即得芍药总苷。

上述步骤(1)中：白芍原料与水的固液比为1：5，调整pH为5，加入纤维素酶10u/g，果胶酶30u/g，酶解温度45℃，酶解时间2.5ｈ。效果较佳。

与现有技术相比，本发明的优点是：

1、本工艺简单，减少了传统的多次回流提取过程，只进行低温酶解释放芍药苷，从而使得工艺过程简单。流程短。

2、传统的回流提取方式，采用温度在100℃，处理时间也较长，因而可能对原料中的有效成分会产生破坏作用，本发明的操作温度低，对有效成分破坏少。

3、成本低；不需要加热回流，操作简单，并且主要溶剂为水，再用乙醇洗脱后可反复回收利用，从而减少溶剂消耗，是的生产成本降低，易于实现工业化生产。

4、本发明收率可达3.5%，纯度可达97%。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步说明。

实施例1：

一种酶法提取白芍中芍药苷的方法，依次包括下述步骤，

(1)提取：称取白芍原料0.8kg，将原料粉碎并过100目筛，溶于2.4kg水中，用1mol/L盐酸调整pH值为6，添加纤维素酶5u/g，果胶酶15u/g，酶解温度40℃，酶解时间3ｈ后放置室温，经高效液相（HPLC）检测，提取液中含有芍药苷0.03g；

(2)离心分离：

将酶解液放入离心机离心分离，离心机转速为5000转/min，时间15min后，收集上清液；

(3)吸附：

将所得上清液浓缩过滤后，上D101大孔吸附树脂，先用水洗脱，洗脱速率1.8mL/min，再用70%乙醇洗脱，洗脱速率2.2mL/min，收集3倍柱体积的乙醇洗脱液；

(4)浓缩：

将所得乙醇洗脱液减压浓缩，回收乙醇；

(5)真空干燥：

将浓缩浸膏置于60℃真空干燥箱中，干燥12h，即得芍药总苷。经高效液相（HPLC）检测，芍药苷得率达到2.8%，纯度为96%。

实施例2：

一种酶法提取白芍中芍药苷的方法，依次包括下述步骤，