[发明专利]二萜单体及从大青中分离制备二萜单体的方法

说明书

技术领域

本发明属于轻工技术领域，涉及中药材大青的深加工技术，具体为从大青中分离制 备高纯度二萜单体的方法。

背景技术

从历代本草记载及民间治病的经验看，大青属多种植物，其具清热解毒、祛风除湿、 活血散瘀、降压、消炎镇痛等功效，常用于治疗感冒高热、风湿性关节炎、跌打损伤、降 血压、痈疽、疔疮等疾病。浙江大青中含有多种萜类物质，现有研究表明天然二萜类物质 有良好的抗癌、抗炎、抗氧化等作用，可以开发成有益于人们身体健康的药品。

现有关于二萜的分离主要采用柱层析和制备型高效液相色谱，其局限性是分离效果 差、制备量少且工作量大。其次，柱层析和制备型高效液相色谱再生使用相对困难，分离 得到的二萜类化合物，难以发展成为制备量大的分离技术。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种成本低廉的从大青中分离制备二萜单体的方法， 采用该方法能较大批量的获得高纯度的二萜单体。

为了解决上述技术问题，本发明提供4种二萜单体，该4种二萜单体分别为二萜单体 (I)、二萜单体(II)、二萜单体(III)和二萜单体(IV)，其结构式分别如下；

本发明还同时提供了一种从大青中分离制备二萜单体的方法，包括以下步骤：

1)、以大青的茎部作为原料，将上述原料放入乙醇溶液中于回流状态下进行提取， 所得的浸提液减压浓缩；得浓缩提取液；

2)、将浓缩提取液用等体积的石油醚萃取，所得萃取液分层后，得位于下层的萃取 后水相；

3)、将萃取后水相用等体积的乙酸乙酯萃取，所得萃取液减压浓缩，得二萜粗提物；

4)、采用逆流色谱方法分离二萜粗提物；

5)、收集逆流色谱分离的目标组分进行减压浓缩，直至固形物质量分数达到70％以上， 再采用冷冻干燥，得到粉末状二萜单体。

作为本发明的从大青中分离制备二萜单体的方法的改进，步骤4)为：

A、配制溶剂系统I和溶剂系统II，溶剂系统I按照石油醚∶乙酸乙酯∶甲醇∶水＝5∶5∶3∶6 的体积比组成，溶剂系统II按照石油醚∶乙酸乙酯∶甲醇∶水＝5∶5∶5∶5的体积比组成；溶剂 系统I充分摇匀后静置，分别得溶剂系统I上相和溶剂系统I下相；溶剂系统II充分摇匀后静 置，分别得溶剂系统II上相和溶剂系统II下相；

B、将溶剂系统I上相注入逆流色谱仪的色谱柱；

C、将溶剂系统I上相和溶剂系统I下相按照1∶1的体积比混合后作为溶剂，将步骤3) 所得的二萜粗提物溶入所述溶剂中，得逆流色谱分离样品溶液；

D、开启逆流色谱仪，选用以下任意一种注入方式：

先注入逆流色谱分离样品溶液，然后注入溶剂系统I的流动相(下相)；或者先注入溶 剂系统I的流动相，平衡后再注入逆流色谱分离样品溶液；

接着，用紫外-可见检测器检测逆流色谱流出液，等前两个峰出来后换成溶剂系统II 的流动相(下相)梯度洗脱，根据所得的色谱图收集目标组分。

作为本发明的从大青中分离制备二萜单体的方法的进一步改进：逆流色谱仪为高速 逆流色谱仪HSCCC或低速逆流色谱仪SRCCC。

作为本发明的从大青中分离制备二萜单体的方法的进一步改进：步骤1)中采用质量 分数为70％～80％的乙醇溶液进行提取，共提取3次，每次提取2.5～3.5小时；每次提取时原 料与所用乙醇溶液的质量体积比为：1g/5ml。

作为本发明的从大青中分离制备二萜单体的方法的进一步改进：步骤2)的萃取次数 为2次，所述步骤3)的萃取次数为2次。

作为本发明的从大青中分离制备二萜单体的方法的进一步改进：步骤1)和步骤3) 中的减压浓缩条件为：真空度低于0.09Mpa，温度为50～60℃；步骤5)中的减压浓缩条件 为：真空度低于0.05Mpa，温度为40～50℃。

作为本发明的从大青中分离制备二萜单体的方法的进一步改进：步骤5)中的冷冻干 燥条件为：真空度低于30Pa，温度为-35～-30℃。

在本发明的分离制备方法中，以逆流色谱仪为分离设备来分离粗提物中的二萜单体， 其溶剂系统由常温常压下处于液态的石油醚、乙酸乙酯、甲醇和水组成，上相做固定相， 下相做流动相。

本发明的优点是：分离效果好、效率高，二萜单体产品的纯度达到95％以上，二萜单 体制备成本远低于现有技术，是一种经济、高效的从浙江大青中分离制备高纯度二萜单体 的方法。