[发明专利]从马铃薯皮中提制龙葵素的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种提取、及分离纯化园艺植物中生理活性成分的绿色化学工艺技术，尤指一种采用超声波辅助提取、及大孔吸附树脂分离纯化马铃薯皮中龙葵素的方法。

背景技术：

马铃薯(Solanum tuberosum L.)为茄科茄属一年生草本植物，有土豆、山药蛋、荷兰薯、洋芋等多种称谓，与水稻、小麦、玉米、高粱一起并称为世界五大粮食作物。我国是世界上最大的马铃薯生产国，种植面积占世界的1/4，产量占1/5。马铃薯块茎富含淀粉，含量可达9％～30％；同时还含有生物碱、花色苷等多种生理活性成分。近年研究发现，马铃薯中含有的生物碱是一类叫龙葵素的活性物质，是由含氮的类固醇基和1～4个单糖通过3-O-糖苷键所组成的甾类化合物，主要分为茄碱(solanine)和卡茄碱(chaconine)两大类。龙葵素不溶于水、乙醚、石油醚，而溶于甲醇，乙醇，戊醇，丙酮等，对碱较稳定，pH大于8时沉淀；在马铃薯中含量为3～10mg/100g；当马铃薯发芽、变绿或腐烂时，龙葵素的含量会显著提高。研究表明，龙葵素具有免疫调节、止咳、抑制乙酰胆碱酯酶、抑制消化道肿瘤细胞的增殖、抑制胃癌与直肠癌以及植物病虫害等多种生理功能。然而，目前国内外对马铃薯的深加工主要集中于淀粉的提取与利用，而龙葵素等生理活性成分大多作为副产物而被浪费。

目前关于提取马铃薯龙葵素粗提物的主要技术有：段光明等对3个马铃薯品种的9个样品分别采用单溶剂(甲醇)法、双溶剂(甲醇-氯仿)法、混合溶剂(四氢呋喃∶水∶乙腈∶冰乙酸＝500∶300∶200∶10)法进行了龙葵素的提取，认为混合溶剂提取法的提取率最高，达28.2mg/100g。张薇等对马铃薯龙葵素分别采用乙醇提取、乙醇-乙酸法(双溶剂法)索氏提取以及混合溶剂法(乙醇∶乙腈∶冰乙酸＝500∶300∶200)提取，认为双溶剂提取效率最好，薯皮中龙葵素提取得率达26.6mg/100g。张薇等又采用微波辅助乙醇-乙酸双溶剂法提取马铃薯皮中的龙葵素，并通过4因素3水平正交试验确定了最佳提取参数为乙醇-冰乙酸体积比100∶10，料液比1∶20，微波功率540W，提取时间6min，龙葵素提取得率为5.11mg/g。

另外，有关植物源性生物碱的分离纯化研究较多，如采用X-5大孔吸附树脂分离纯化新乌头碱和乌头总碱，大孔吸附树脂NKA-9、D-101、AB-8对白芥子生物碱的吸附性能，D101大孔吸附树脂分离纯化黄连总生物碱的效果最好，这些研究都为生物碱类物质的分离纯化提供了可借鉴的方法和参数，然而却鲜见马铃薯龙葵素的分离纯化研究。

马铃薯化学成分复杂，既含有易溶于乙醇等极性溶剂的活性成分，也含有易溶于水或缓冲液的蛋白质、酶、多糖等水溶性生物大分子杂质和鞣质、有机酸、低聚糖等不溶性生物小分子杂质，甚至还含有易溶于石油醚等非极性溶剂的脂类、树胶等脂溶性杂质成分。显然上述有关马铃薯龙葵素提取及植物源性生物碱分离纯化方法虽能制备具有一定纯度和得率的马铃薯龙葵素提取物，但由于受到技术手段的限制以及加工过程中使用了大量的有毒有机溶剂或化学制剂，使得产品明显存在安全性欠佳或者纯度与得率不高、易吸湿、功效不明显、产品的品质和市场竞争力不足等缺陷。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题是：针对上述现有技术的不足，提供一种高效、绿色安全、低成本、高得率、较高纯度、适用于工业生产的，以超声波辅助乙醇提取、及用大孔吸附树脂分离纯化从马铃薯皮中提制龙葵素的方法。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种从马铃薯皮中提制龙葵素的方法，该方法包括如下步骤：

a、以超声波辅助乙醇从马铃薯皮中提取龙葵素粗提物：取于室温遮光条件下放至变绿且发出新芽的马铃薯皮3～6mm厚，于50～80℃烘干至恒重，粉碎，过0.2～0.8mm筛；用体积浓度为30～95％并经冰乙酸调节pH值为2～6的乙醇，按1公斤马铃薯皮粉加10～25升乙醇的比例在30～90℃以100～300W超声辅助提取两次，每次提取时间为10～30分钟，合并两次提取的粗滤液并过200目尼龙布，离心，取澄清液，离心转速为3000～5000转/分，离心时间为5～15min；将澄清液在-0.05～-0.09MPa、40～45℃下浓缩，回收乙醇溶剂后真空冷冻干燥，得粗提物，用α-茄碱标准品为基础的紫外可见分光光度测定法分析，为龙葵素粗提物；