[发明专利]一种酸模素的提取纯化方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种酸模素的提取纯化方法，尤其是一种采用树脂吸附和超临界CO₂抗溶剂结晶结合的分离纯化方法。

背景技术：

酸模素(Musizin)，又名羊蹄根素。

化学名称：1-(1，8-dihydroxy-3-methylnaphthalen-2-yl)ethanone；

分子式：C₁₃H₁₂O₃；分子量：216.23；

分子结构为：

理化性质：为黄色针状结晶，mp.164℃-165℃。

药理研究表明酸模素具有抗菌、抗真菌作用。对深红色发癣菌、枯草杆菌、白色念珠菌和八迭球菌的最低抑菌浓度分别为：50，25，100，100μg/ml；可以作为抗氧化剂用于食品和化妆品。对睪丸激素还原酶有抑制作用；含有酸模素的牙粉制品可以预防和治疗牙龈炎和牙床的脓溢。中国专利(申请号200610046584.1)利用羊蹄根根部所含的大黄素、酸模素等成份，抑制、杀灭红色毛癣菌、及其它致病菌，达到治愈脚气病的目的。

酸模素天然存在于蓼科植物酸模属植物中，其中羊蹄(药圃)中酸模素含量为0.3883％，羊蹄(南京)中含量为0.6601％，羊蹄(佘山)中含量0.1370％，齿果酸模中中含量0.1429％，金不换中含量0.1377％，酸模中含量0.0108％。

目前国内尚无酸模素提取纯化工艺方面的专利，郑水庆等发表的“中药羊蹄化学成分的研究(I)”，采用80％乙醇室温冷浸提取多次，减压浓缩，依次用二氯甲烷等多种溶剂萃取，在二氯甲烷的提取物经硅胶柱层析分离得到酸模素，该方法提取率低，提取时间长，分离量小，不适用于大规模生产。

发明内容：

本发明旨在为开发一种抗真菌中药新药提供高纯度原料酸模素，所要解决的技术问题为酸模素的提取分离纯化方法。本发明的技术方案是以酸模属植物为原料，用溶剂提取得提取液，再经大孔树脂富集分离和结晶三部分组成，其特征在于：所述原料为毛脉酸模或羊蹄等酸模属植物，提取溶剂为甲醇或乙醇，提取方法可选渗漉提取、回流提取或超声提取，浓缩成浸膏，然后用大孔树脂富集，不同溶剂梯度洗脱，浓缩洗脱液，收集酸模素流分，浓缩干燥，再采用乙酸乙酯重结晶，最后用超临界CO₂抗溶剂结晶纯化。

具体步骤为：

1)将原料粉碎后加1-15倍有机溶剂提取，合并提取液；

2)将提取液浓缩成浸膏，上样至大孔树脂吸附，洗脱剂为氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇中的一种或两种以上混合溶液洗脱或不同比例梯度洗脱，收集洗脱液，主要收集含量65％以上的酸模素流分，浓缩干燥成黄色粉末，采用乙酸乙酯重结晶2-3次，纯度达95％以上；

3)将纯度95％以上产品配制成乙酸乙酯饱和溶液，投入超临界CO₂流体抗溶剂结晶装置，结晶条件为：压力≤15MPa，温度≤78℃；停机收集结晶可制得纯度98.5％以上酸模素。

所述提取溶剂为乙醇或甲醇。

所述洗脱剂每次洗脱用量为3-8BV。

所述大孔树脂可选XSD-1、DA201、DM301，LSA型大孔树脂等。

所述超临界CO₂抗溶剂结晶压力为10-15MPa，温度45-7℃，时间30-100分钟。

本发明为医药企业提供一种酸模素的提取纯化方法，集溶剂提取——大孔树脂吸附——溶剂重结晶——超临界CO₂抗溶剂结晶方法对酸模属植物进行加工制备高纯度酸模素单体。该提取纯化工艺具有产品纯度高、速度快、周期短，安全、不污染环境等优点。

具体实施方式：

下述实施例中酸模素的检测采用高效液相色谱法(参照原源等“HPLC法测定酸模属植物根中酸模素的含量”文献)，具体方法如下：

色谱条件：

色谱柱：C18(10μm，250×4.5mm)；

柱温：室温；

流动相：甲醇-水-高氯酸(800∶200∶1)；

紫外检测波长：254nm；

流速：1.0ml/min；

灵敏度：0.5AUFS；

进样量：20μl。

实施例1：

a.称取1kg金不换根粉碎成粗粉，装填入渗漉柱中，向渗漉柱中加入700ml甲醇溶液，在40-5℃下浸泡30分钟使其充分渗透，保温状态下开启渗漉柱出口阀，同时自渗漉柱顶部连续加入甲醇溶液，控制流速在15ml/min，直至收集到3000ml渗漉提取液；