[发明专利]一种金叶黄杨的组织培养方法有效
| 申请号: | 201010207123.4 | 申请日: | 2010-06-22 |
| 公开(公告)号: | CN102293150A | 公开(公告)日: | 2011-12-28 |
| 发明(设计)人: | 陈建华;黄建荣;沈勤 | 申请(专利权)人: | 上海上房园艺有限公司 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 赵志远 |
| 地址: | 201114*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 金叶 黄杨 组织培养 方法 | ||
1.一种金叶黄杨的组织培养方法,其特征在于,该方法是摘取金叶黄杨上部的小芽依次进行无菌化处理、芽的分化和增殖、不定芽壮苗培养、生根培养和炼苗与移栽得到金叶黄杨种苗。
2.根据权利要求1所述的一种金叶黄杨的组织培养方法,其特征在于,所述的无菌化处理是:将摘取金叶黄杨上部的小芽,用自来水冲洗2h后于超净工作台上,用浓度为75wt%的乙醇浸泡20-40s,1wt‰的升汞溶液浸泡10-20min,经无菌水冲洗5-6次后用无菌滤纸吸干表面水份,取小芽基部切成1cm长接种于诱导培养基上;
所述的芽的分化和增殖是:小芽接种于诱导培养基上6周后,小芽基部开始膨大,出现黄绿色突起,1周后可见明显的愈伤组织,培养1个月,然后切下带芽愈伤组织放入不定芽增殖培养基进行培养;
所述的不定芽壮苗培养是:在不定芽增殖培养基中诱导出的丛生芽,将大丛芽分成小丛或单芽后,放入壮苗培养基上,不定芽迅速伸长,20天后可以长成2-3cm的小植株;
所述的生根培养是:取高度为2-3cm的小植株,转接入生根培养基中诱导生根,20天后幼苗基部分化出许多白色的根原基,30天后可以长至4-6cm;
所述的炼苗与移栽是:生根培养20-30天,根系长至1-2cm时,选择根系发达生长健壮的无菌苗,室内开瓶炼苗5天,取出后洗净根部琼脂,在温室中驯化40天后,即可移栽室外,给予肥水管理即可。
3.根据权利要求2所述的一种金叶黄杨的组织培养方法,其特征在于,所述的小芽诱导培养基的成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。
4.根据权利要求3所述的一种金叶黄杨的组织培养方法,其特征在于,所述的小芽诱导培养基的成分优选MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。
5.根据权利要求2所述的一种金叶黄杨的组织培养方法,其特征在于,所述的增殖培养基的成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。
6.根据权利要求5所述的一种金叶黄杨的组织培养方法,其特征在于,所述的增殖培养基的成分优选MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。
7.根据权利要求2所述的一种金叶黄杨的组织培养方法,其特征在于,所述的壮苗培养基的成分为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 或MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L ,优选MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。
8.根据权利要求2所述的一种金叶黄杨的组织培养方法,其特征在于,所述的生根培养基的成分为MS+NAA0.05mg/L、MS+NAA0.1mg/L或MS+NAA0.2mg/L。
9.根据权利要求8所述的一种金叶黄杨的组织培养方法,其特征在于,所述的生根培养基的成分优选MS+NAA0.1mg/L。
10.根据权利要求1所述的一种金叶黄杨的组织培养方法,其特征在于,所述的小芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基成分还包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L,该培养基的培养温度为24-26℃,光照为70-90μmol/ms,pH值为5.5-6.0。
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