[发明专利]一种尖顶羊肚菌胞外多糖提取物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种尖顶羊肚菌胞外多糖提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将尖顶羊肚菌液体发酵液浓缩至原体积的1/3～1/6，得到浓缩液，浓缩温度为50～70℃；

(2)浓缩液采用Sevage法去蛋白、离心，得到去蛋白后的活性提取液；

(3)去蛋白后的活性提取液用1～5倍体积的95％乙醇在0～10℃透析沉降浓缩液中的多糖12～25小时，pH值为4～8，静置析出絮状白色物质，再离心分离得到白色沉淀，冷冻干燥，制得尖顶羊肚菌胞外多糖提取物。

2.根据权利要求1所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)Sevage法去蛋白、离心是在浓缩液中加入0.2倍体积的氯仿正丁醇混合液，在恒温磁力搅拌器上搅拌30分钟，用Sigma台式冷冻离心机，温度4℃，以4000rpm的转速离心10分钟，回收上清液即去蛋白后的活性提取液。

3.根据权利要求1所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述尖顶羊肚菌液体发酵液浓缩至原体积的1/5，所述浓缩温度为60℃；步骤(3)中所述活性提取液用4倍体积的95％乙醇在4℃透析沉降浓缩液中的多糖25小时，pH值为6。

4.根据权利要求1所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述尖顶羊肚菌液体发酵液是经过尖顶羊肚菌(Morchella conica)液体发酵培养，得到发酵物，再通过离心和真空抽滤分离菌丝体，获得的发酵液。

5.根据权利要求4所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述尖顶羊肚菌液体发酵培养是将尖顶羊肚菌接种到液体发酵培养基中发酵培养，其液体发酵培养基配方为：葡萄糖150g，硝酸铵6g，KH₂PO₄3.0g，MgSO₄·7H₂O 3.0g，维生素B10.3g，加蒸馏水定容至3000ml。

6.根据权利要求5所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述发酵培养的步骤是：(1)取100ml所述液体发酵培养基，在其中接入3个直径为4mm的尖顶羊肚菌菌丝块，经灭菌后，在25～28℃，转速130～160rpm，避光恒温振荡培养6～8天，得到液体菌种；(2)将上述液体菌种接入3L灭菌后的所述液体发酵培养基中，培养温度为25～28℃，转速为130～160rpm，培养5～9天，得到发酵物。

7.根据权利要求1所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述离心条件为：转速4000-5000rpm、时间20-30min。

8.一种顶羊肚菌胞外多糖提取物，是由权利要求1～7任一顶所述的方法制备得到。

9.权利要求8所述的尖顶羊肚菌胞外多糖提取物在制备抗氧化和延缓衰老药物或保健食品中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述尖顶羊肚菌胞外多糖提取物的使用剂量为50mg/kg·d。