[发明专利]哈茨木霉固体发酵制造促旱生作物授粉和座果的制剂的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物肥料领域，特别涉及哈茨木霉固体发酵制造促旱生作物授粉和座果制剂的方法。

背景技术

木霉(Trichoderma.Spp)属于半知菌类的丛胞菌纲，丛梗孢目丛梗孢科，广泛存在于土壤、植物根围、种子、叶缘和腐烂木材等生态环境中。出于木霉菌的广泛适应性、广谱性及多机制性，根据本发明专利申请者长期研究结果表明，木霉不仅一直是植物病生防学家研究重点对象，而且通过物理学方法有目的的改造(如N⁺束、紫外线、γ-射线照射等技术)，从腐烂木材分离筛选出的木霉突变株(H-13)。

化学肥料和有机农药(含植物生长调节剂)对生态环境的污染，推动人们对农产品安全性的重视。我国加入WTO后农产品的卫生质量问题尤为突出。当前无公害农产品的生产和消费热潮正在兴起，随着化学物质在农业生产中的应用限制越来越严，对于农业生产中发挥重要增产作用的植物生长促进剂无疑提出了更高的要求，各国研究者正在寻找天然微生物肥料和生物源农药。化学肥料在使用过程中破坏了土壤结构和微生物生长环境，影响土壤微生物对营养物质的分解与利用，不利于植物对营养物质的吸收。由木霉产生的植物生长调节物质能促进作物生长，并能改善因长期使用化学肥料而使土壤结构破坏、污染农产品及危害人畜的状况，是化学合成调节剂的极具潜力的替代之一。

发明内容

为了弥补现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种哈茨木霉固体发酵制造促旱生作物授粉和座果制剂的方法。

本发明的另一目的在于提供一种上述方法制备的哈茨木霉固体发酵制造促旱生作物授粉和座果制剂。

本发明的又一目的在于提供上述哈茨木霉固体发酵制造促旱生作物授粉和座果制剂的应用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：一种哈茨木霉固体发酵制造促旱生作物授粉和座果的制剂的方法，包括以下操作步骤：

(1)配制固体培养基：将质量百分数90％的晒干磨碎的甘蔗渣粉或秸秆粉，与质量百分数2％的培养液混合拌匀，加入质量百分数5％的鸡粪和质量百分数3％的蔗糖，加水充分拌匀，控制湿度为70％～75％，于120～123℃高温和1.05～1.35大气压条件下蒸汽消毒40～60分钟，得到固体培养基；

(2)在固体培养基中以每升含19.5～20.5万个孢子的量接种哈茨木霉H-13孢子，充分拌匀，得到发酵基料；

(3)将发酵基料盖上塑料布，送入经过过滤的空气中，在温度26～30℃条件下，发酵5～7天，发酵过程中以每分钟65～80rpm的搅拌速度进行翻动，每隔30分钟～2小时置换经过过滤的空气，湿度保持在72～78％；

(4)打开塑料布，凉至室温，通风干燥，使含水量降至质量百分含量10～15％，烘干后，再粉碎成粒状发酵物，得到促旱生作物授粉和座果的制剂。

步骤(2)所述哈茨木霉H-13孢子的种子发酵液按如下方法配制：

配制液体PDA培养基，添加质量百分数1％～5％木糖+蔗糖或纤维素二糖+葡萄糖作为碳源，再添加质量百分数0.2％～7％的畜禽血粉、质量体积比7.5～19.0mg/L的硼酸钠、质量体积比20～30mg/L的硫酸锌(ZnSO₄)、质量百分数0.02％～0.3％的磷酸二氢钾(KH₂PO₄)、质量百分数0.05％～0.5％的磷酸氢二钾(K₂HPO₄)、质量百分数0.05％～0.4％的硫酸镁(MgSO₄)和水，混合拌匀，控制湿度为72％～78％，调pH至5.7～6.5后高压灭菌，得到液体培养液；按照每升液体培养液中接入9个直径为9cm的培养皿的哈茨木霉H-13孢子量的比例，接入哈茨木霉H-13孢子，发酵温度设为25～40℃，发酵时间为5～7天，得到种子发酵液；所述木糖+蔗糖中的木糖和蔗糖以质量比2∶1混合；所述纤维素二糖+葡萄糖中的纤维素二糖和葡萄糖以质量比2∶1混合。

步骤(2)所述哈茨木霉H-13孢子的种子发酵液优选按如下方法配制：