[发明专利]斑点吴风草的植株培养方法

权利要求书

1.斑点吴风草的植株培养方法，其特征在于，该组织培养方法包括无菌处理、分化增殖、壮苗培养、生根培养及炼苗移栽五个步骤，具体步骤如下所示：

(1)无菌处理：将斑点吴风草小芽用自来水冲洗2h后于超净工作台上，依次采用浓度为75％的乙醇浸泡20-30s、1‰的升汞浸泡10-15min、无菌水冲洗5-6次并用无菌滤纸吸干表面水分，将小芽基部切成1cm长度后接种于芽诱导培养基上，控制培养温度为24-26℃，光照为70-90μmol/ms，进行芽诱导培养；

(2)分化增殖：小芽接种于芽诱导培养基上3周后开始膨大并出现黄绿色突起，再培养2周后小芽长势明显，继续培养1个月，切下带芽愈伤组织接种于增殖培养基中，控制培养温度为24-26℃，光照为70-90μmol/ms，进行增殖培养；

(3)壮苗培养：在增殖培养基中诱导出丛生芽，每丛有2-3株可以伸长，将其分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基中，控制培养温度为24-26℃，光照为70-90μmol/ms，进行壮苗培养，20天后可以长到2-3cm；

(4)生根培养：将壮苗培养基中的植株转接入生根培养基中控制培养温度为24-26℃，光照为70-90μmol/ms，进行生根培养，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基20天后出现众多须根；

(5)炼苗移栽：生根培养25-30天，根系长至1-2cm，选择根系发达生长健壮的无菌苗在室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂并在温室中继续驯化40-50天，将其可移栽室外即可。

2.根据权利要求1所述的斑点吴风草的植株培养方法，其特征在于，所述步骤(1)中芽诱导培养基的营养成分为MS+6-BA1.0～5.0mg/L+NAA0.1～0.5mg/L。

3.根据权利要求2所述的斑点吴风草的植株培养方法，其特征在于，所述芽诱导培养基的营养成分优选MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。

4.根据权利要求1所述的斑点吴风草的植株培养方法，其特征在于，所述步骤(2)中增殖培养基的营养成分为MS+6-BA1.0～3.0mg/L+NAA0.1～0.3mg/L。

5.根据权利要求4所述的斑点吴风草的植株培养方法，其特征在于，所述增殖培养基的营养成分优选MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

6.根据权利要求1所述的斑点吴风草的植株培养方法，其特征在于，所述步骤(3)中壮苗培养基的营养成分为MS+6-BA0.5～2.0mg/L+NAA0.1～0.2mg/L。

7.根据权利要求6所述的斑点吴风草的植株培养方法，其特征在于，所述壮苗培养基的营养成分优选MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

8.根据权利要求1所述的斑点吴风草的植株培养方法，其特征在于，所述步骤(4)中生根培养基的营养成分为MS+NAA0.05～0.2mg/L。

9.根据权利要求8所述的斑点吴风草的植株培养方法，其特征在于，所述生根培养基的营养成分优选MS+NAA0.1mg/L。

10.根据权利要求1所述的斑点吴风草的植株培养方法，其特征在于，所述的培养基的基准成分包括蔗糖30g/L及琼脂6g/L。