[发明专利]超临界提取拳参中单宁和绿原酸的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及超临界提取拳参中单宁和绿原酸的方法，尤其是一种采用超临界手段分离制备单宁和绿原酸的方法。

背景技术：

拳参又名紫参、山虾、草河车、倒根草，生于阴湿山坡、草丛或林间草甸中。主产华北、西北及山东、江苏、湖北。药材为蓼科植物拳参Polygonum bistorta L.的干燥根茎。春初发芽时或秋季茎叶将枯萎时采挖，除去泥沙，晒干，去须根。

拳参根茎含没食子酸(gallic acid)、并没食子酸(ellagic acid)以及可水解鞣质和缩合鞣质。还含右旋儿茶酚(catechol)，左旋表茶酚(epicatechol)，6-没食子酰葡萄糖galloylglucose)，3，6-二没食子酸葡萄糖(3，6-digalloyl glucose葡萄糖(glucose)。又含羟基甲基蒽醌、维生素、β-谷甾醇的异构体等。全草含绿原酸(chloroenic acid)，咖啡酸(caffeicacid)，原儿茶酸(protocatechuic acid)及金丝桃甙(hyperin)等。

单宁是多酚中高度聚合的化合物，又称单宁酸、鞣质，分子式：C₇₆H₅₂O₄₆分子量：1701.22。

单宁为黄色或棕黄色无定形松散粉末，在空气中颜色逐渐变深，有强吸湿性；不溶于乙醚、苯、氯仿，易溶于水、乙醇、丙酮，水溶液有涩味。

绿原酸(Chlorogenic acid)，分子式：C₁₆H₁₈O₉，分子量：354.30。

绿原酸在110℃变为无水化合物，熔点208℃，[α]24D-35.2℃(c＝2.8)。25℃水中溶解度为4％，热水中溶解度更大；易溶于乙醇及丙酮，极微溶于醋酸乙酯。由于绿原酸本身的不稳定性，提取时不能高温、强光及长时间加热。

提取绿原酸普遍使用的方法有：水提取法、乙醇回流法、水提醇沉法等。虽然微波、超声波、酶解等辅助手段能使获得较高提取率，但这些方法在保留有效成分、去除无效成分等方面，存在着能耗大、工序多、周期长、有效成分损失大等缺点。中国专利CN1400199“一种从杜仲叶中连续提取活性物质的方法”所公开的方法中绿原酸路线提取需要加热，很容易导致绿原酸被破坏；洗脱后要进行多次重结晶，虽然得到了纯度很高的绿原酸成品，但生产周期延长，而且绿原酸的收率也进一步降低。陈晓娟等《酶法及半仿生法提取杜仲叶中绿原酸和黄酮》用酶使细胞壁破裂，方便提取或用模拟人体消化系统中pH的方法改善提取效果。但酶法没能解决酶的后处理问题。半仿生法的温度偏高，很有可能不利绿原酸的保全；pH的改变势必需要监控设备，而且监控也存在滞后性，使得工业生产时反应难以满足最优条件；且用到多种溶剂，也会使后处理复杂化。

发明内容：

发明人经工艺优化试验，发明了超临界提取拳参中单宁和绿原酸的方法。该工艺原料利用率高，环保，产品收率高。

本发明是采用以下技术方案实现的：

1)超临界提取：取拳参干燥根部，粉碎为40-80目，置超临界提取釜中，加入夹带剂，通过高压泵二氧化碳转化成超临界流体，第一次在较低压力下提取2-4小时，引出提取液减压解析出绿原酸粗提物，釜内再升至较高压力第二次提取3-4小时，引出提取液减压解析出单宁粗提物；

2)单宁纯化：上述单宁粗提物分散于热水中，减压浓缩至原体积的1/10-1/15，静置结晶，重复2-3次，即得单宁产品。

3)绿原酸纯化：上述绿原酸粗提物分散于稀乙醇溶液中，通过聚酰胺树脂吸附，用去离子水和不同浓度乙醇分段洗脱，高浓度乙醇洗脱液先通过截留分子量2000-3000的超滤膜除杂，收集透过液，用纳滤膜浓缩系统浓缩，喷雾干燥，即得绿原酸产品。

上述提取方法，其特征在于所述1)中浸泡为70％乙醇，用量为原料质量的1/5-1/2(V/W)。

上述提取方法，其特征在于所述1)中第一次提取温度为50℃，压力为10-13Mpa，流速为0.12L/h，解析压力为常压。

上述提取方法，其特征在于所述1)中第二次提取温度为50℃，压力为22-30Mpa，流速为0.12L/h，解析压力为常压。

上述提取方法，其特征在于所述2)中水温为80℃，用量为单宁粗提物质量的6-8倍(W/V)，养晶时间为每次1-1.5h。

上述提取方法，其特征在于所述3)中稀乙醇浓度为10-15％，用量为绿原酸粗品质量的3-5倍。