[发明专利]一种具有双重功效的体外诊断试剂盒防腐剂

说明书

技术领域

本发明涉及医学体外诊断领域，具体地说是一种具有双重功效的体外诊断试剂盒防腐剂。

背景技术

防腐剂是体外诊断试剂盒必不可缺少的成份，它能防止试剂盒因微生物的生长引起的腐败变质，使试剂盒在规定的环境中具有一定的有效性。目前国内外试剂盒大多数采用化学剂，而采用的这些防腐剂中大部分都具有毒性，部分具有腐蚀性，对使用者及环境都潜在很大的危险性及污染。

现有诊断试剂盒中常用的防腐剂有硫柳汞、叠氮钠、抗生素等。

硫柳汞在ELISA(酶联免疫反应)试剂中曾普遍使用，但因其有毒，现较少或几乎不使用。市面许多试剂盒产品，用抗生素(如庆大霉素)做防腐剂较多，较叠氮钠试剂毒性作用小，但试验过程中发现抗生素类药物根据其化学结构有着不同的抗菌谱，抗菌谱最广的也仅仅限于大部分的原核微生物，无法对全部微生物起效。因此，抗生素只是可以对抗细菌，但是不能对抗除细菌外的其它微生物，且长时间不能达到完全防腐的作用。

叠氮钠是目前体外诊断试剂盒最常用的防腐剂，虽然其防腐效果尚好，但其对过氧化特酶、抗体的活性都有一定的抑制作用。此外，叠氮钠已纳入2008年的剧毒化学品来管理。叠氮钠和氰化物相似，对细胞色素氧化酶和其它酶有抑制作用，并能使体内氧合血红蛋白形成受阻，有显著的降压作用。对眼和皮肤有刺激性，如吸入、口服或经皮肤吸收，可引起中毒死亡；同时，受热、接触明火、或受到摩擦、震动、撞击时可发生爆炸。叠氮钠与酸类剧烈反应会产生爆炸性的叠氮酸，与重金属及其盐类会形成十分敏感的化合物。可见叠氮钠虽然为试剂盒最常用的防腐剂，但在使用过程中对人体、环境潜在着较大的危险性。

ProClin系列防腐剂是SUPELCO公司推出新一代高效生物防腐剂，可以有效地控制体外诊断试剂中微生物的生长。当浓度达到0.02％条件下，ProClina系列防腐剂具有广谱抗菌活性，能在比较长的时间内抑制细菌、真菌和酵母菌等微生物的生长；同时，它又能保持体系中酶的活性，因此它是一种理想的可替代硫汞撒、叠氮化钠和庆大霉素等物质的生物防腐剂，但因其价格昂贵，现在只少量用于临床研究。因此，目前寻找一种价格合适、有效且无毒害作用的试剂盒防腐剂是非常必要的。

发明内容

本发明的目的是提供一种价格合适、无毒性、无腐蚀性、对使用者及环境均无潜在危险且能够提升体外诊断试剂盒性能指标的防腐剂。

为此，本发明采用如下的技术方案：一种具有双重功效的体外诊断试剂盒防腐剂，其特征在于所述的防腐剂采用蒜汁，其用量为体外诊断试剂盒中试剂体积总量的0.5％-6.0％，最优选为0.5％-3.5％。

蒜汁有效成分大蒜素的分子式为：C₆H₁₀OS₂，具有抗念球菌属菌、隐球菌属菌和须发癣菌等抗菌作用，是一种杀菌效果很理想的广杀菌剂，其作用原理为：大蒜素独特的分子结构使它具有浓烈的大蒜气味。大蒜素的杀菌作用主要是因为其中的二烯丙基硫醚具有独特的生物活性。烯丙基是共轭结构基团，它的电负性较高，可部分地给毗邻的硫原子提供电子，使硫的缺电子性减小，活性增大，且能产生一定量的具生物活性的含硫基团，而许多含硫基团是已知的有效杀菌剂，能破坏细菌的蛋白质合成等生理过程。蒜汁的主要特点就是抗菌广谱，抑菌力强，且对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌、霉菌都具有极强的杀灭作用，可有效地抑制试剂盒中细菌的生长。

上述的体外诊断试剂盒防腐剂，蒜汁由大蒜中提取，其采用浸泡提取法，其过程如下：取新鲜大蒜，去皮捣碎成糊状，所得的蒜泥加入乙醇溶液，密封放置10-20天，离心去渣，滤液抽滤，将滤液减压蒸馏去除乙醇即可。

本发明对防腐剂的用量确定过程如下：蒜汁与试剂的比例按0.5％、1％、1.5％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％、5.5％、6.0％配制了11个试剂盒(以视黄醇结合蛋白测定试剂盒为例)，防腐剂的用量不影响试剂盒的有效成份及性能指标作为前提，结果如下表：

上述实验数据表明，蒜汁的用量在0.5％-6.0％范围内，RBP测定试剂盒的各项技术指标均在可接受范围内，但在0.5％-3.5％范围内各项指标测定结果为最理想状态。

本发明对防腐效果的确定如下：

因为在0.5％-3.5％范围内各项指标测定结果为最理想状态，所以配制含蒜汁0.5％、1.0％、1.5％、2.5％、3.0％、3.5％系列浓度的RBP测定试剂盒，效期后12个月，观察试剂盒的技术指标，直至效期后13个月，结果如下：