[发明专利]一种醛缩酶、编码基因、载体、工程菌及其应用

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种醛缩酶，以及编码该醛缩酶的基因、载体、工程菌及其应用。

(二)背景技术

醛缩酶作为催化碳碳原子立体成键的酶，可以广泛的应用在有机化学合成中，它可以方便的以小分子为起点向大的复杂分子方向进行不对称催化合成，这个过程在碳水化合物为底物的反应中意义尤为突出。应用酶的高区域选择性，能够容易避开对碳水化合物中的活泼的羟基的保护，更为突出的是在催化碳碳键合成的同时醛缩酶可以引入新的手性中心。正是这种能够高效引入手性碳原子的能力，使得醛缩酶在药物分子合成领域中有着广泛的应用，与化学工艺相比，具有明显优势，如：避免了有毒有害物质的使用，合成可在常温常压条件下进行。从替代传统化学合成工艺催化剂的角度，该酶催化的反应具有很强的绿色属性，对传统化学工艺的绿色化学改造有着重要意义，因而该酶具有广阔的应用前景。

(三)发明内容

本发明的目的是提供一种新的、编码基因、载体、工程菌及其应用。该新的醛缩酶与常规醛缩酶相比具有很好的耐高温、耐有机溶剂的稳定性。

本发明采用的技术方案是：

一种来源于Aciduliprofundum boonei的醛缩酶基因(DERA)，具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列：

atgaatcgca aggagcttgc aaaatatatt gaccatacaa atttgaaggc ctttgccaca   60

agggaagaca taaagagatt gtgcgatgag gcgaaagagt atggattcta tgcggtgtgc  120

gtaaatccat acagggttaa ggatgctgcc gagtttttga agggcacgga tataaaaata  180

gcctctgtag ttggctttcc tctgggggca acattcaccg aaacaaaggt tcaagaggcg  240

ataatgaccg ttcgcaacgg tgcggatgag attgatatgg ttatgaacat aggggctatg  300

aaggatggag attatggatt tgtggaaaga gatataagag aagttgttga agcggtgcat  360

ccaatgggtg ccaaggtaaa ggtgataatt gagacatgct atctaagcga tgaggagaaa  420

attaaggcat gcgaacttgc caagaaagca ggtgcagatt ttgtgaagac ctccactggg  480

ttcggcacag cgggagcgaa ggttgaggat gttaaattga tgcgcagtgt ggttggcaat  540

gatatgggtg taaaagctgc tggcggaata cataatgcaa aggaggcaat tgcaatgata  600

gaggcgggag cgacaagaat aggagctagc agaagtgtgc agattattga aacgctggaa  660

ttgatatga                                                          669

由于核苷酸序列的特殊性，任何SEQ NO：1所示多核苷酸的变体，只要其与该多核苷酸具有90％以上同源性，均属于本发明保护范围之列。所述多核苷酸的变体是指一种具有一个或多个核苷酸改变的多核苷酸序列。此多核苷酸的变体可以使生的等位变异体或非生的变异体，包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个多个核苷酸的取代、缺失或插入，但不会从实质上改变其编码的氨基酸的功能。

一种耐热耐有机溶剂的醛缩酶，由所述醛缩酶基因编码。具体的，所述醛缩酶具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列：

Met Asn Arg Lys Glu Leu Ala Lys Tyr Ile Asp His Thr Asn Leu Lys

1               5                   10                  15

Ala Phe Ala Thr Arg Glu Asp Ile Lys Arg Leu Cys Asp Glu Ala Lys