[发明专利]肝炎病毒变异的多重检测

权利要求书

1.检测肝炎病毒(HV)变异的方法，包括a)提供来自患有HV感染的个体的HV的DNA分子作为模板，其中所述DNA分子包含HV变异位点；b)沿所述模板延伸多重延伸引物以获得含有所述变异位点的核苷酸的延伸产物；以及c)通过质谱术(MS)分析所述延伸产物以检测所述HV变异。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述HV是乙型肝炎病毒(HBV)。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中通过进行使用SEQ ID NOs：1-4所示引物的2重PCR来提供所述DNA分子。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述模板在虾碱性磷酸酶(SAP)处理后提供。

5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中通过进行使用SEQID NOs：5-16所示引物的12重iPLEX反应，通过进行使用SEQ ID NOs：17-33所示引物的17重iPLEX反应，通过进行使用SEQ ID NOs：34-50所示引物的17重iPLEX反应，或通过进行使用SEQ ID NOs：51-64所示引物的14重iPLEX反应来延伸所述多重延伸引物。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述MS是基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱术(MALDI-TOF MS)。

7.通过质谱术分析检测肝炎病毒(HV)变异的试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1所述方法中所用的多重延伸引物。

8.如权利要求7所述的试剂盒，其中所述HV是乙型肝炎病毒(HBV)。

9.如权利要求7或8所述的试剂盒，其中所述多重延伸引物是SEQID NOs：5-16，SEQ ID NOs：17-33，SEQ ID NOs：34-50或SEQ ID NOs：51-64所示的引物。

10.如权利要求7-9中任一项所述的试剂盒，其还包括扩增引物。

11.如权利要求10所述的试剂盒，其中所述扩增引物是SEQ ID NOs：1-4所示的引物。

12.如权利要求7所述的试剂盒，其还包括用于PCR的试剂、用于引物延伸的试剂、用于去磷酸化的试剂和/或MassARRAY iPLEX^TM所包括的试剂。

13.如权利要求12所述的试剂盒，其中所述用于去磷酸化的试剂是虾碱性磷酸酶(SAP)。