[发明专利]一种新型抗肿瘤血管生成多肽

说明书

技术领域

本发明涉及抗肿瘤药物的研究，尤其是涉及一种新型抗肿瘤血管生成多肽。

背景技术

血管生成是在原有血管内皮细胞基础上形成新血管的自然过程。血管生成在肿瘤生长和转移过程中起着非常重要的作用，不仅可以为肿瘤生长和转移提供必需的氧气和营养物质，而且还可以带走所产生的代谢废物。许多与肿瘤血管生成相关的生长因子已经被鉴定出来，包括碱性呈纤维生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、以及血管生成素(Ang)等。目前肿瘤血管生成相关因子的研究主要集中于VEGF家族和Ang家族。

VEGF家族及其受体VEGFR在生理及病理性的血管与淋巴管的形成过程中起着非常重要的作用。VEGF家族包括六个成员，即VEGF-A，VEGF-B，VEGF-C，VEGF-D，VEGF-E和PIGF。在肿瘤血管生成的过程中，VEGF-A是最重要的调节者。VEGF-A是一个同源二聚体蛋白，能够被选择性地切割成为分别含有121、145、165、189和206个氨基酸残基的片段。研究表明VEGF165在内皮细胞增殖、迁移和管状形成过程中起着关键作用，VEGF165产生的信号优先通过酪氨酸激酶受体VEGFR-2(KDR)进行转导，并且能够通过与内皮细胞膜上的NRP-1相互作用形成包含VEGF165、KDR和NRP-1的三聚体复合物，从而使其信号转导作用显著增强。

血管内皮细胞上另一个重要的特异性酪氨酸激酶受体是Tie-2，其通过与配体Ang-1和Ang-2结合来调节血管生成的功能。Ang-1是一个活性配体，它不仅能够诱导Tie-2磷酸化，而且可以促进内皮细胞生存、迁移和血管稳定。Ang-2是Ang-1的天然拮抗剂，能够抑制Tie-2的作用，从而导致血管去稳定。此外，研究表明同时抑制由VEGFR-2和Tie-2介导的信号通路比单独抑制其中一条通路有更强的维持正常血管及肿瘤相关血管完整和稳定的能力。因此，理想的抗血管生成疗法可能需要同时抑制VEGFR-2和Tie-2介导的信号通路，从而能够显著抑制肿瘤的生长和转移。

近年来，通过噬菌体展示文库技术已经鉴定出许多内源性多肽，这些多肽在血管生成过程中起着重要的作用，其中包括两条七肽，即ATWLPPR(V1)和NLLMAAS(V2)。ATWLPPR通过与NRP-1特异性结合并选择性抑制VEGF 165与NRP-1结合来实现其体内外抗血管生成活性，从而抑制肿瘤的生长和转移。而NLLMAAS则能够以剂量依赖的方式来抑制Ang-1和Ang-2与Tie-2的结合并抑制Ang-1诱导的ERK活性，体内试验表明NLLMAAS能够抑制鸡胚尿囊膜上的血管生成。因此，ATWLPPR、NLLMAAS及其它们的衍生物可能成为发展新型抗肿瘤血管生成和治疗其他血管疾病的良好药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够显著抑制移植瘤生长和转移的新型抗肿瘤血管生成多肽。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的新型抗肿瘤血管生成多肽，由17个氨基酸残基组成，分子量为1683，氨基酸序列为

Ala-Thr-Trp-Leu-Pro-Pro-Arg-Ala-Ala-Asn-Leu-Leu-Met-Ala-Ala-Ser。

所述多肽(V3肽)由V1肽和V2肽通过柔性连接子Ala-Ala构建而成；所述V1肽的氨基酸序列为Ala-Thr-Trp-Leu-Pro-Pro-Arg，分子量为840；所述V2肽的氨基酸序列为Asn-Leu-Leu-Met-Ala-Ala-Ser，分子量为717。

本发明的优点在于首次将两条具有抗血管生成活性的多肽，即V1肽(ATWLPPR)和V2肽(NLLMAAS)通过柔性连接子Ala-Ala连接起来，从而构建一条新的多肽V3(ATWLPPRAANLLMAAS)。研究表明V3肽能够显著抑制S180和H22移植瘤的生长，并且随着浓度的提高，抑瘤效果逐渐增强，呈现出明显的剂量依赖性。此外，随着V3肽浓度的升高，裸鼠移植瘤中的微血管数目逐渐减少，亦表现出一定的剂量依赖性。在相同浓度下，与V1、V2及V1+V2组相比，V3肽能够表现出更强的抗肿瘤生长与抗肿瘤血管生成能力。同时，V3肽对裸鼠免疫系统及重要脏器无明显毒性，给药期间对裸鼠的体重增加没有明显影响。提示V3肽能够成为一种有效的抗肿瘤候选药物，从而为进一步的临床研究与应用奠定坚实的基础。

附图说明

图1、图2、图3分别是V1、V2、V3肽的质谱鉴定图。