[发明专利]禽IL-2与新城疫病毒HN基因重组融合蛋白及其应用无效
| 申请号: | 201010172224.2 | 申请日: | 2010-05-14 |
| 公开(公告)号: | CN101870733A | 公开(公告)日: | 2010-10-27 |
| 发明(设计)人: | 张春杰;王臣;程相朝;李银聚;吴庭才;刘一尘;丁轲;余祖华;赵战勤 | 申请(专利权)人: | 河南科技大学 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/81;C12N1/19;A61K39/39;A61K39/17;A61P31/14;C12R1/84 |
| 代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
| 地址: | 471003 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | il 新城 疫病 hn 基因 重组 融合 蛋白 及其 应用 | ||
1.chIL-2-HN融合蛋白,其特征在于:包括禽白细胞介素2(chIL-2)的氨基酸序列、新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(HN蛋白)的氨基酸序列、以及位于禽白细胞介素2氨基酸序列和新城疫病毒HN蛋白的氨基酸序列之间的柔性Linker肽氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的chIL-2-HN融合蛋白,其特征在于:由禽白细胞介素2(chIL-2)基因和鸡新城疫病毒HN基因通过柔性Linker肽串联连接而成。
3.根据权利要求1或2所述的chIL-2-HN融合蛋白,其特征在于:该蛋白具有SEQIDNO.7所示的氨基酸序列。
4.根据权利要求1或2所述的chIL-2-HN融合蛋白,其特征在于:所述的柔性Linker肽具有SEQIDNO.6所示的氨基酸序列。
5.一种分离的DNA序列,其特征在于:编码具有序列为SEQIDNO.7所示的氨基酸序列的融合蛋白。
6.根据权利要求5所述的DNA序列,其特征在于:具有SEQIDNO.5所示的核苷酸序列。
7.一种重组毕赤酵母载体,其特征在于:它含有权利要求6所述的DNA序列。
8.一种宿主细胞,其特征在于:它含有权利要求6所述的DNA序列。
9.一种重组融合蛋白,其特征在于:由以下方法获得:
(a)获得编码chIL-2-HN融合蛋白的基因序列;
(b)将步骤(a)获得的chIL-2-HN融合蛋白的基因序列,插入到毕赤酵母载体pPICZαA中,得到重组表达的毕赤酵母载体,命名为pPICZαA-chIL-2-HN;
(c)将步骤(b)获得的重组表达的毕赤酵母载体pPICZαA-chIL-2-HN,电击转化入毕赤酵母菌X-33感受态细胞中,高抗性筛选和PCR鉴定,获得表达重组融合蛋白的基因毕赤酵母X-33菌株;
(d)将步骤(c)获得的表达重组融合蛋白的基因工程酵母X-33菌株,在适宜的培养条件下培养,分离培养液上清,获得重组融合蛋白。
10.如权利要求9所述重组融合蛋白在鸡新城疫预防和治疗中的应用。
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