[发明专利]涉及脑膜炎球菌外膜囊泡的改进

说明书

本申请是国际申请PCT/IB2005/002801，国际申请日2005年9月5日，中国国家阶段申请号200580029469.7，名称“涉及脑膜炎球菌外膜囊泡的改进”的发明专利申请的分案申请。

文中引用所有文献全文纳入本文作为参考。

技术领域

本发明涉及用于免疫目的的脑膜炎球菌外膜囊泡领域。

背景技术

赋予抗脑膜炎奈瑟球菌(Neisseria meningitidis)(脑膜炎球菌)感染的免疫力的各种方法之一是使用外膜囊泡(OMV)。挪威国立公众健康研究所(Norwegian NationalInstitute of Public Health)已经制造了抗血清群B的有效OMV疫苗[‘MenBvac^TM’；例如，参考文献1]，尽管这种疫苗是安全的并能预防MenB疾病，但其功效仅限于用来制备疫苗的同源血清型。

‘RIVM’疫苗基于含有六种不同PorA亚型的OMV。它已在II期临床试验中在儿童中显示出免疫原性[2]。

参考文献3公开了抗血清群B脑膜炎球菌不同致病血清型的疫苗，该疫苗基于保留了65kDa蛋白复合体的OMV。参考文献4公开了含有遗传工程改造的脑膜炎球菌菌株OMV的疫苗，所述OMV包含至少一种1类外膜蛋白(OMP)但不含2/3类OMP。参考文献5公开了含有在其表面环中有突变的OMP的OMV以及含有脑膜炎球菌脂多糖(LPS)衍生物的OMV。参考文献6公开了制备基于OMV的血清群A脑膜炎球菌疫苗的方法。

已有多种提高OMV功效的建议。参考文献7公开了添加有运铁蛋白结合蛋白(例如，TbpA和TbpB)和/或Cu，Zn-超氧化物歧化酶的含有OMV的组合物。参考文献8公开了添加有各种蛋白质的含有OMV的组合物。参考文献9公开了从具有修饰的fur基因的脑膜炎奈瑟球菌(N.meningitidis)获得的膜囊泡制品。参考文献26称，同时敲除porA和cps可上调nspA的表达。为制备OMV的脑膜炎奈瑟球菌的其它敲除突变体公开于参考文献26-28。与这些通过改变表达模式而改进OMV的尝试不同，参考文献29将注意力集中在改变OMV的制备方法，并称，通过避免使用诸如脱氧胆酸盐之类的去污剂可以在提取囊泡时保留诸如NspA的抗原。

脑膜炎球菌OMV不能引起抗非同源血清型的交叉保护限制了它们作为通用疫苗的用途，但它们对于已经基本上克隆出致病菌株的流行性疾病非常有效。因此，FinlayInstitute的疫苗(VA-MENGOC-BC^TM)已经被用于拉丁美洲，该处的血清群B疾病主要是P1.19，15血清型，但这种疫苗在其它地方无效[10]。类似地，Chiron的MeNZB^TM疫苗的靶标是自1991年以来在新西兰流行的流行性菌株(P1.7b，4，最新的命名法又称为P1.7-2，4)。

参考文献11公开了含有多价脑膜炎球菌细胞泡(bleb)组合物的疫苗，包括衍生自脑膜炎球菌菌株的第一细胞泡，该菌株具有在使用国流行的血清亚型和衍生自脑膜炎球菌菌株的第二细胞泡，该菌株无需具有在使用国流行的血清亚型。

本发明的目的是提供其它和改进的脑膜炎球菌OMV制品。

发明内容

使用MeNZB^TM的经验显示，抗特定流行性菌株的OMV对于控制疾病地方性爆发非常有效。联用大规模并可再现的制备技术可在疾病爆发后迅速制备疫苗。因此，本发明提供了制造脑膜炎球菌外膜囊泡(OMV)疫苗的方法，该方法包括以下步骤：(i)鉴定与脑膜炎球菌性脑膜炎爆发有关的脑膜炎球菌菌株的血清亚型；(ii)从具有步骤(i)中鉴定的血清亚型的脑膜炎球菌菌株制备OMV用于制备疫苗。该方法可包括以下一个或两个额外步骤：(iii)将所述OMV配制成疫苗；和(iv)在被或者可能被所述疾病爆发影响的地理区域分销所述疫苗。就已经鉴定出相关血清亚型的情况而言，本发明还提供了相同但省略了步骤(i)的方法。所述脑膜炎球菌菌株将通常为血清群B，当也可以是血清群A、C、W135、Y等。