[发明专利]一种苹果总三萜的制备方法及用该方法制备的苹果总三萜

说明书

技术领域

本发明属于医药及保健食品技术领域，特别涉及一种活性三萜物质的制备方 法及用该方法制备的产品。

背景技术

长期以来，苹果大量用于鲜食和果汁生产，随着我国果汁加工业的迅猛发展， 苹果汁加工的主要副产品-苹果皮和苹果渣大量产生，而它们正是活性三萜物质 的良好来源。但是目前这些资源除少量的被加工成饲料和用于提取苹果多酚外， 绝大部分都被当做垃圾扔掉，尤其是生产旺季，大量的苹果皮和苹果渣堆积腐烂， 这不仅造成资源的巨大浪费，还严重污染了环境，因此充分利用这些废弃资源不 仅具有良好的经济效益还具有社会效益。

目前已报导的苹果总三萜类化合物的提取方法有超声提取法，此法提取总三 萜类化合物目前未能应用于大批量生产，同时此法所选用的化学溶剂相对较多， 其应用受到一定的限制。

发明内容

本发明的目的就是针对上述背景技术的状况而提供一种工艺简单且大批量 制备可行的苹果总三萜的制备方法和用该方法获得的高品质的苹果总三萜。。

本发明方法采用的技术方案是：以苹果为原料通过提取和纯化制备苹果总三 萜。其特征在于纯化是对苹果提取物依次进行：

1、大孔树脂吸附和解析；

2、不同浓度的洗脱溶剂洗脱；

3、收集富含三萜类化合物的洗脱液。

其中：大孔树脂可以是极性、中等极性、弱极性或非极性大孔树脂；洗脱溶剂包 含有无水或含水乙醇、无水或含水甲醇。

本发明方法的具体步骤可以是：

一、提取：

1、对原料用浓度≥0的醇液进行回流提取，收集提取液；

2、对提取液进行减压浓缩，获取苹果提取物；

其中，醇液包含有无水或含水乙醇、无水或含水甲醇。

二、纯化：

1、用醇液对苹果提取物进行溶解，并将所得溶解液滴加到装有大孔树脂的 柱床中后进行静止吸附；

2、用水和不同浓度的醇液对静止吸附样品后的大孔树脂柱进行梯度洗脱分 离，收集富含三萜类化合物的洗脱液；

3、对上步收集到的洗脱液进行浓缩，获取苹果总三萜。

为了进一步提高苹果总三萜的性能和质量：

1、提取时：

1)醇液选择浓度为70％的乙醇溶液；

2)醇液和原料的重量比值在3-10的范围内进行选择；

2、纯化时：

1)用浓度95％的乙醇溶液对苹果提取物进行加热超声溶解；

2)苹果提取物溶解液滴加到大孔树脂柱中后的静止吸咐时间≥2小时；

3)对静止吸附样品后的大孔树脂柱进行梯度洗脱的醇液选择为乙醇溶 液，其组成梯度的浓度选择为50％、70％、95％，且每一浓度洗脱4个保留体积；

4)收集95％乙醇浓度的洗脱液。

本发明的产品是根据本发明的方法制得的，本发明的产品中的主要成分含量 为：总三萜≥85％；乌苏酸≥44％；齐墩果酸≥6％。

经高效液相色谱分析：利用本发明方法制备的苹果总三萜包括多种三萜类成 分，其中尤以乌苏酸(Ursolic acid)和齐墩果酸(Oleanolic acid)两个三萜类成 分为主要成分，两者的含量之和在苹果总三萜中大于50％。利用比色法对本发明 制备的苹果总三萜进行含量测定，以乌苏酸为对照品，其总三萜含量大于85％。

经DPPH烷自由基测定方法测试表明：本发明的产品具有很强的清除烷自由 基能力，具有抗氧化作用；经MTT法测试表明：本发明的产品具有很强的抑制 人癌细胞增殖活性，具有预防和治疗癌症作用；不仅如此，还具有较强的抗炎、 抗过敏、抗糖尿病、降脂护肝作用。可广泛应用于医药、保健食品及化妆品等领 域。

本发明不仅工艺简单、可大规模生产：而且可直接利用苹果产业的废弃原 料(苹果皮和苹果渣)，从中提取苹果总三萜，变废为宝。

附图说明

图1为本发明所述苹果总三萜的HPLC图谱；

图2为相同条件下乌苏酸的HPLC图谱；

图3为相同条件下齐墩果酸的HPLC图谱；

图4为本发明所述苹果总三萜类化合物的HPLC指纹图谱。

具体实施方式

以下通过具体实施例来进一步阐述本发明。

实施例一：

一、制备苹果总三萜：