[发明专利]一种追踪荆州黑麦染色体6RL抗白粉病基因的分子标记方法

权利要求书

1.辅助筛选荆州黑麦6R染色体长臂所携抗白粉病基因的引物对，是引物对CINAU145、引物对CINAU450和/或引物对CINAU895中的任何一对：

引物对CINAU145的脱氧核糖核苷酸序列如列表中序列SEQ ID NO.1和序列SEQ ID NO.2所示；

引物对CINAU450的脱氧核糖核苷酸序列如列表中序列SEQ ID NO.3和序列SEQ ID NO.4所示；

引物对CINAU895的脱氧核糖核苷酸序列如列表中序列SEQ ID NO.5和序列SEQ ID NO.6所示。

2.一种辅助筛选荆州黑麦6R染色体长臂抗白粉病基因的方法，包括如下步骤：以待测小麦材料的DNA作为模板，用权利要求1所述引物对中的至少一对引物进行PCR扩增，检测扩增产物，扩增产物中有1500bp、400bp和/或850bp条带的待测材料为候选的抗白粉病小麦材料。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增中，每10μL的PCR反应体系如下：

包含20ng的模板DNA，10×含10nmol L^-1Tris-HCl和50nmol L^-1KCl的PCR buffer 1μL，1.25mmolμL^-1dNTP 0.8μL，25mmolμL^-1 MgCl₂0.8μL，Taq酶0.1U，100μmol L^-1引物各0.2μL，加ddH₂O补充反应体系至10μL。

所述PCR扩增的程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，50或55℃退火45s，72℃延伸1min，循环32次；72℃延伸10min

所述检测PCR产物是对扩增产物进行8％非变性连续聚丙烯酰胺凝胶Acr∶Bis＝39∶1电泳，然后银染显色。

4.权利要求1所述引物对CINAU145、CINAU450和/或CINAU895在制备辅助筛选抗白粉病小麦的试剂盒中的应用。

5.含有权利要求1所述引物对中至少一对的辅助筛选抗白粉病小麦的试剂盒。

6.权利要求1所述引物对在小麦育种中的应用。

7.权利要求2或3所述方法在小麦育种中的应用。

8.权利要求5所述试剂盒在小麦育种中的应用。