[发明专利]一种新型的动物乳腺炎检测方法及检测仪

说明书

技术领域

本发明属于泌乳动物乳腺炎检测的技术，更具体的说是泌乳动物亚临床乳腺炎的早期检测技术。

背景技术

乳腺炎是泌乳家畜中最常见的疾病，每年都会给乳业带来具大的经济损失，表现为患病家畜的奶质量和奶产量显著降低，治疗费和管理费增加。乳腺炎根据其临床程度分为临床型和亚临床型。临床乳腺炎造成乳房红肿，或伴有全身和乳房局部症状。产出有凝块、絮片以及水样奶，可以用肉眼立即检出；而亚临床型(或非临床)乳腺炎的检出则需要借助仪器或其它化学方法。家畜亚临床乳腺炎占乳房炎发病率的90％，是危害泌乳家畜的重要疾病之一。及时检测出亚临床乳腺炎，就可以及时控制疾病的进一步发展，提高治疗效果。从而降低个体病畜对整体畜群感染的机会，减小经济损失。

乳腺炎的诊断方法有乳液的细胞学检查，电导率测定，pH值的检查，乳清电泳诊断法，酶检测法，PCR检测法等。加州乳腺炎检测法(CMT)是目前使用较普遍的一种简便、快速的方法，但此法仅可用于临床乳腺炎的定性检测，由于其灵敏度差，假阳性的检出率可高达50％，不能用于亚临床乳腺炎的检测。实验室用一种叫流式细胞仪来检测乳液的体细胞数，其原理是当乳液样品通过仪器的单细胞通道时，仪器可自动记录通过的体细胞数，但是这种仪器价格昂贵，体积大，不能用于现场的病牛检测。市场上曾有一种使用检测牛奶电导率的装置(MSA-D-Tec)来检测乳腺炎，此方法是根据牛奶中的电解质(Na⁺和Cl^-)随着奶中的体细胞数增加而升高的原理而设计的，此方法简便、快速。但灵敏度比较差，假阳性的检出率也高，而且每次测定都需要用被测牛的奶样进行仪 器校正，另外，实验证明并非所有感染乳腺炎牛奶的电导率均会升高，而牛奶导电性的升高也并非完全来自于患有乳腺炎的奶牛。近年来，出现了一种使用检测奶样中髓过氧化酶(myoloperoxidase，MPO)的技术来诊断亚临床乳腺炎，它是根据奶样中的体细胞数和MPO的浓度有较群强的相关性(相关系数值0.91)，使用酶联免疫吸附试验(ELISA)对奶样中的MPO的检测来判断乳房内中性粒细胞的活性状态，可对奶牛的亚临床乳腺炎做出早期诊断，但此技术操作复杂，费时，仅局限于实验室的检测。牛奶体细胞电子测定仪(PortaSCC)是近来出现在国内市场诊断临床和亚临床乳腺炎的一美国产品，此仪器的设计来源于人体白细胞的体外检测技术，即通过测定体细胞膜表面生物酶与特异底物的反应，这种反应能够使试纸颜色发生变化，牛奶样品中的体细胞数越多，颜色越深。此仪器的特点是，现场实施，操作简便；但仪器成本高，检测需时长，样本的测试条件要求严格。

发明内容

本发明的目的在于提供一种技术设计新颖、操作简便、检测迅速、成本低的泌乳动物乳腺炎的检测技术，可以克服上述乳腺炎检测技术的缺陷。

本发明的技术内容如下：测定把在患病家畜奶液中加入反应试剂后形成的混合凝胶通过一层纤维过滤膜的时间，来检测患病家畜奶液中的体细胞数，从而进一步评估家畜感染乳腺炎的程度。它的原理是，家畜感染乳腺炎后，奶中体细胞数随之增加。将一种带负电皂化物(SDS)与奶样混合，奶中体细胞的核酸DNA会释放出来，并与此种带负电皂化物相互反应结合形成凝胶，体细胞的数量越多则凝胶形成越多，导致奶液的粘稠度增加，通过纤维过滤膜的时间便长。以本发明所提供的方法而设计的检测仪可以定量地测出奶中的体细胞数，快速辩别临床和亚临床乳腺炎。

装置设计由图1至图5组成：本发明提供的检测方法是通过样本容器和微处理器共同完成的。本设计是通过直接采用电信号中断记时的方法对细胞数进行测试的一种设计，也可以通过其他的信号中断如电容、电磁、光、等信号中断记时的方法对细胞数进行测试。

附图说明

装置设计总体组装图如图1和图2所示。包括：1.仪器盒上盖；2.电源开关；3.样本容器信号输入输出端与微处理器接口件a；4.仪器盒底座；5.样本容器台；6.仪器盒底座上接口件(3，7)的安装孔；7.样本容器信号输入输出端与微处理器接口件b；8.样本容器组合；9.微处理器控制板；10重新计数健；11.显示器。

样本容器组合如图3和图4所示组成，包括：12.样本容器上盖；13.信号输入输出端与仪器接口件a，14.信号传导通路a，15.样本凝胶纤维过滤膜.16.底座，17.底座上的过滤薄膜支撑架，18.信号传导通路b，19.信号输入输出端与仪器接口件b，20.样本接受部漏斗，21.传感器监视口，22.样本容器把手，23.样本容器和信号输入输出端与仪器接口件的装配孔。微处理器控制示意图如图5所示。