[发明专利]一种修饰内吗啡肽-1化合物及其在镇痛方面的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一类新的内吗啡肽-1(Endomorphin-1，EM-1)类似物及其制备方法和在治疗疼痛方面的应用。

背景技术

疼痛是一种与实际上或潜在的组织损伤相关联的，或基于这种损伤的，可叙述的不愉快的感觉和情绪经验。然而，疼痛特别是长期疼痛给患者带来痛苦和不安，剧痛还可以引起失眠或其他生物功能紊乱，影响患者的生活质量。阿片类镇痛药是最古老的镇痛药，也是迄今为止最有效的镇痛药物，因其止痛作用强，在缓解重度疼痛具有无可取代的地位。但是，由于其诸如呼吸抑制、心搏过缓、耐受、成瘾等方面的副作用，对病人产生了很大的危害，很大程度上限制了其在镇痛方面的应用。从而，另辟蹊径，发现新型的低副作用的阿片类镇痛药物是目前科学研究的热点。

阿片类镇痛药物主要是通过μ阿片受体发挥镇痛作用，所以自从μ阿片受体的内源性配体内吗啡肽(见Zadina，J.E.；Hackler，L.；Ge，L.J.；Kastin，A.J.A potent and selective endogenous agonist for the μ-opiatereceptor.Nature.1997，386：499-502)被发现后，科学家们对其进行了广泛而深入的研究。研究表明：内吗啡肽通过与G蛋白偶联的μ阿片受体结合，可参与对痛觉、心血管、呼吸、胃肠、运动、行为、内分泌及免疫等诸多功能的调节，但其主要药用作用为镇痛功能。同时发现，在中枢给药情况下，内吗啡肽可产生强度与吗啡相当而副作用较少的镇痛作用。其中内吗啡肽-1(Tyr-Pro-Trp-Phe-NH₂)具有优于内吗啡肽-2(Tyr-Pro-Phe-Phe-NH₂)的治疗学特性，如奖赏行为与镇痛作用的分离，耐受的形成较内吗啡肽-2发展更慢一些，镇痛剂量明显低于引起呼吸抑制及心血管作用的剂量等，因此推测内吗啡肽-1比内吗啡肽-2更适于作为新的安全阿片类镇痛药物先导化合物。

内吗啡肽-1具有酶解稳定性差，血脑屏障通透能力弱的缺点，从而限制其在临床上的应用。因此，通过对内吗啡肽-1进行结构改造，在尽量不降低或提高其亲和活力的前提下，提高酶解稳定性和血脑屏障通透能力；从而得到外周给药产生高效镇痛活性的内吗啡肽-1类似物成为近年研究的方向。

发明内容

本发明以内吗啡肽-1为母体对其进行改造，旨在设计和合成一种修饰内吗啡肽-1化合物，具有亲和能力高、酶解稳定性好，血脑屏障通透能力强的低副作用的类似物，通过动物实验预示该类似物可成为外周给药具有强效镇痛活性低副作用的药物。

一种修饰内吗啡肽-1化合物，其结构式为：

其结构特征为：内吗啡肽-1类似物[GAGPC]-EM-1，[GAGFC]-EM-1，[GAGDC]-EM-1的1位Tyr进行N端胍基化，类似物[HAGPC]-EM-1的1位Tyr未改变；2位Pro被D-Ala-Gly替换；3位Trp保持不变；4位Phe分别为苯环对位氯化、氟化修饰或未修饰。

本发明的化合物的制备方法采用HOSu(N-羟基琥珀酰亚胺)/DCC(环己基羰二亚胺)活化酯法接肽，“2+3”法合成EM-1的新类似物。合成路线如下(见附图1)：采用苄氧羰酰氯(Cbz-Cl)于无水条件下分别保护脒基吡唑盐酸盐(GUPy·HCl)的氨基和亚氨基，合成化合物双苄氧羰酰脒基吡唑(Cbz₂GUPy)；Cbz₂GuPy与1.2倍过量的化合物g的脱Z产物在碱性条件(三乙胺调pH)、N，N’-二甲基甲酰胺(DMF)溶液中反应生成化合物h；同时，化合物i经DCC/HOSu活化，与氨水缩合将其酰胺化得化合物j；化合物k经DCC/HOSu活化，与化合物j的脱Boc产物反应得化合物l；化合物m经DCC/HOSu活化，与化合物l的脱Boc产物反应得化合物n；化合物h经DCC/HOSu活化，与化合物n的脱Boc产物反应得化合物o；钯碳/氢气脱化合物o的N端保护基得终产物p。硅胶簿层层析分纯终产物，冷冻干燥机冻干，得到冻干粉。纯化后的最终产物经RP-HPLC，TLC，ESI-MS确定其结构及纯度，类似物纯度为95％-99％。

本发明的另一目的是提供修饰内吗啡肽-1类似物在镇痛方面的应用。

本发明的优点和产生的有益效果：