[发明专利]一种首乌藤多糖的制备方法

权利要求书

1.一种首乌藤多糖的制备方法，其特征在于，将首乌藤干燥、粉碎，得首乌藤粉末，首乌藤粉末与碱溶液以1∶5-30的重量体积比混合，然后用80-95℃水浴回流提取2-3次，每次1-5h，过滤，合并滤液，调pH为7，浓缩至首乌藤粉末重量体积的1-2倍，再加入乙醇至含醇量达到80％，静置12小时，离心去除上清液，得第一次多糖沉淀物，第一次多糖沉淀物加蒸馏水溶解，得多糖溶解液，上树脂柱，直到流出液在473nm处的吸收度与树脂柱上层溶液的吸收度相同，即大孔吸附树脂吸附达到饱和，用蒸馏水洗脱树脂柱至molish反应无紫色环时停止收集，将洗脱液浓缩至首乌藤粉末重量体积的0.5-1倍，加入乙醇至含醇量达到80％，静置12小时，离心去除上清液，得第二次多糖沉淀物，再依次加入第二次多糖沉淀物重量体积的1-2倍量的无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤，离心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得首乌藤多糖；所说的碱溶液是摩尔浓度为0.05-1mol/L的NaOH水溶液、0.05-1mol/L的KOH水溶液、0.01-1mol/L的Na₂CO₃水溶液中的一种；所说的树脂柱，是预处理的树脂柱，树脂柱的预处理方法是，取树脂用乙醇浸泡24小时，湿法装柱，继续用乙醇作流动相清洗树脂，洗至流出的乙醇与水混合不呈白色混浊为止，再以蒸馏水作流动相通过树脂层，洗净乙醇，树脂柱湿态保存备用；所说的树脂为DA-201、D101、HPD-600、AB-8、XDA-6、LSA-20、CAD-45、D860021中的一种。

2.根据权利要求1所述的首乌藤多糖的制备方法，其特征在于，将100克首乌藤干燥、粉碎，得首乌藤粉末，首乌藤粉末与摩尔浓度为0.07-0.8mol/L的NaOH水溶液800mL混合，85℃水浴回流提取5h，过滤，得第一次滤液，第一次回流提取后的药渣再加入摩尔浓度为0.07-0.8mol/L的NaOH水溶液550mL，80℃水浴提取4h，过滤，得第二次滤液，并和第一次滤液合并，用盐酸调pH为7，浓缩至120mL，再加入乙醇至含醇量达到80％，静置12小时，离心去除上清液，得第一次多糖沉淀物，第一次多糖沉淀物加100mL蒸馏水溶解，得多糖溶解液，上DA-201树脂柱或HPD-600树脂柱，直到流出液在473nm处的吸收度与DA-201树脂柱或HPD-600树脂柱上层溶液的吸收度相同，即大孔吸附树脂吸附达到饱和，用蒸馏水洗脱DA-201树脂柱或HPD-600树脂柱至molish反应无紫色环时停止收集，将洗脱液浓缩至100mL，加入乙醇至含醇量达到80％，静置12小时，离心去除上清液，得第二次多糖沉淀物，再依次加入20mL的无水乙醇、20mL的丙酮、20mL的乙醚洗涤，离心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得首乌藤多糖干粉10g。

3.根据权利要求1所述的首乌藤多糖的制备方法，其特征在于，将500克首乌藤干燥、粉碎，得首乌藤粉末，首乌藤粉末与摩尔浓度为0.07-0.8mol/L的KOH水溶液7500mL混合，90℃水浴回流提取4h，过滤，得第一次滤液，第一次回流提取后的药渣再加入摩尔浓度为0.07-0.8mol/L的KOH水溶液5000mL，85℃水浴提取3h，过滤，得第二次滤液，并和第一次滤液合并，用盐酸调pH为7，浓缩至500mL，再加入乙醇至含醇量达到80％，静置12小时，离心去除上清液，得第一次多糖沉淀物，第一次多糖沉淀物加500mL蒸馏水溶解，得多糖溶解液，上D101树脂柱或XDA-6树脂柱，直到流出液在473nm处的吸收度与D101树脂柱或XDA-6树脂柱上层溶液的吸收度相同，即大孔吸附树脂吸附达到饱和，用蒸馏水洗脱D101树脂柱或XDA-6树脂柱至molish反应无紫色环时停止收集，将洗脱液浓缩至500mL，加入乙醇至含醇量达到80％，静置12小时，离心去除上清液，得第二次多糖沉淀物，再依次加入500mL的无水乙醇、500mL的丙酮、500mL的乙醚洗涤，离心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得首乌藤多糖干粉48g。

4.根据权利要求1所述的首乌藤多糖的制备方法，其特征在于，将2000克首乌藤干燥、粉碎，得首乌藤粉末，首乌藤粉末与摩尔浓度为0.03-0.8mol/L的Na₂CO₃水溶液56000mL混合，95℃水浴回流提取2h，过滤，得第一次滤液，第一次回流提取后的药渣再加入摩尔浓度为0.03-0.8mol/L的Na₂CO₃水溶液40000mL，90℃水浴回流提取2h，过滤，得第二次滤液，第二次回流提取后的药渣再加入摩尔浓度为0.03-0.8mol/L的Na₂CO₃水溶液30000mL，90℃水浴提取1h，过滤，得第三次滤液，并和第一、第二次滤液合并，用盐酸调pH为7，浓缩至2500mL，再加入乙醇至含醇量达到80％，静置12小时，离心去除上清液，得第一次多糖沉淀物，第一次多糖沉淀物加2000mL蒸馏水溶解，得多糖溶解液，上AB-8树脂柱或LSA-20树脂柱，直到流出液在473nm处的吸收度与AB-8树脂柱或LSA-20树脂柱上层溶液的吸收度相同，即大孔吸附树脂吸附达到饱和，用蒸馏水洗脱AB-8树脂柱或LSA-20树脂柱至molish反应无紫色环时停止收集，将洗脱液浓缩至1500mL，加入乙醇至含醇量达到80％，静置12小时，离心去除上清液，得第二次多糖沉淀物，再依次加入2000mL的无水乙醇、2000mL的丙酮、2000mL的乙醚洗涤，离心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得首乌藤多糖干粉195g。