[发明专利]B细胞CD22胞外抑制性肽段B2285疫苗的制备

说明书

技术领域

本发明属于生物技术药物和生物治疗学领域，涉及一种具有抑制B细胞效应的小鼠B细胞表面特征性分子CD22(mCD22)胞外肽段B2285，应用B2285制备的疫苗或药物组合物可用于治疗B细胞参与或主要介导的免疫性疾病，尤其是抗心肌抗体检测为阳性的免疫性心肌病和自身抗体为阳性的系统性红斑狼疮。

背景技术

自身免疫病是由于自身免疫失调所致，目前治疗上以对症和应用免疫抑制剂等缓解症状为主，无特异性安全治疗方法。B淋巴细胞异常激活以及致病性自身抗体的生成是自身免疫病的重要特征之一，以B细胞为靶点治疗B细胞异常增殖活化介导为主的疾病如系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎和非霍奇金淋巴瘤(NHL)等自身免疫相关性疾病已引起人们越来越多的关注。

CD19、CD20与CD22均为B细胞表面特异性受体分子，在B细胞生长、分化和细胞内信号转导过程中起重要作用，是目前应用单克隆抗体治疗B细胞异常增殖活化的疾病较准确的靶分子。由于CD22单克隆抗体具有以下特点：(1)与CD19单抗相比，CD22单抗在异常增殖的B细胞上表达稳定，且仅表达于成熟的B细胞表面，不表达于非B细胞、骨髓细胞、造血干细胞和非造血细胞，不会抑制新B细胞生成；(2)与CD20单抗相比，CD22单抗可内化配体，在一定程度上降低抗体介导的细胞毒作用。因此，CD22已逐渐成为B细胞异常激活疾病治疗研究的重要靶分子。

虽然过去研究报道认为CD22为B细胞抑制性受体，应用抗CD22抗体封闭可明显降低B细胞表面受体激活的B细胞反应阈值，然而Leonard等观察鼠源性抗CD22抗体(LL2)和人源性抗CD22抗体(Epratuzunab)治疗非霍奇金氏病的临床前和临床效应发现，抗CD22抗体可在一定程度上清除异常B细胞。最近研究证实，抗CD22单克隆抗体(CD22McAb)可清除致敏的B细胞、抑制自身抗体产生，阻止或缓解SLE和类风湿性关节炎等自身免疫病的发生发展，而且我们新近研究发现，CD22McAb可以抑制ANT诱导的免疫性DCM小鼠B细胞增殖和抗ANT自身抗体的产生，在疾病中期应用可在很大程度上逆转DCM的进程。

在现有的治疗SLE的研究中，抗CD22单抗Epratuzunab虽然显示了抑制B细胞功能效应，但由于它作用时间短、给药频繁、成本高，并且在制作过程需引入外源性蛋白，对机体仍有一定的免疫毒性，因而目前在临床治疗中难以推广。多肽治疗性疫苗因其具有化学性质稳定、治疗特异性高、作用时间长、治疗费用低、无需反复给药、安全性高和患者依从性好等特点，已成为近年来备受关注的新型生物治疗技术。

免疫系统针对机体特定分子的不同抗原表位可以产生不同的抗体，这些抗体结合到靶分子的不同功能表位可以产生不同的生物学效应。上述抗CD22McAb对B细胞产生截然相反的作用让我们认识到，针对CD22分子不同抗原表位的抗CD22McAb与CD22结合后可产生抑制/激活两种不同效应，因此，如果我们能筛选出具有抑制作用的mCD22胞外肽段制备多肽疫苗，主动免疫患有免疫性疾病动物后将产生具有治疗效应(抑制B淋巴细胞)的抗肽抗体，既具有化学性质稳定、治疗特异性高、作用时间长、治疗费用低、安全性高等特点，又可降低异己蛋白抗体(CD22McAb)的免疫原性，减少其毒性副作用，成为治疗自身免疫病一种新的策略。

动物医学实验都是为人类疾病的治疗服务的。由于白细胞分化抗原在进化上较保守，小鼠和人的CD22蛋白分子具有高度同源性(经NCBI中blast数据库分析，二者评分为1025，E值为0)，且其空间结构类似。因此，借用小鼠模型研究出的抑制性肽段在人CD22分子上找到相对应的人源性序列，对临床治疗B细胞相关疾病具有重大社会和经济价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种小鼠B细胞mCD22胞外抑制性肽段，通过该肽段制备的疫苗或药物组合物免疫机体，可以克服异己蛋白抗体(CD22McAb)的免疫原性，使之具有毒性副作用少、疗效好、安全性高和使用方便等特点，对抗心肌抗体检测为阳性的免疫性扩张型心肌病的治疗以及其他主要由B细胞介导或有B细胞参与的免疫性疾病(如系统性红斑狼疮)等的免疫治疗及相关疫苗、药物的制备提供新的策略。