[发明专利]显微染色鉴别冬春夏草粉的方法有效
| 申请号: | 201010151881.9 | 申请日: | 2010-04-21 |
| 公开(公告)号: | CN101804082A | 公开(公告)日: | 2010-08-18 |
| 发明(设计)人: | 张雪峰;徐丽 | 申请(专利权)人: | 张雪峰 |
| 主分类号: | A61K36/068 | 分类号: | A61K36/068;A61P1/14;A61P37/02;A61P35/00;G01N1/30;G01N21/84 |
| 代理公司: | 成都虹桥专利事务所 51124 | 代理人: | 刘世平 |
| 地址: | 610041 四川省成都*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 显微 染色 鉴别 冬春夏草粉 方法 | ||
1.鉴别纯冬虫夏草粉的方法,其特征在于:包括以下步骤:
取待检冬虫夏草粉,分别染色制成涂片;所述染色为进行苏木精-伊红-碘液染色;
将制成的涂片于显微镜下进行显微观测,如每片均能清晰观察到冬虫夏草的特有结构, 且没有观测到明显的植物组织或没有碘液染色下的明显蓝色斑点,即可判断为纯冬虫夏草粉, 否则为不纯的冬虫夏草粉;所述的冬虫夏草的特有结构为冬虫夏草的虫体菌丝体、冬虫夏草 的虫体表皮层、冬虫夏草的虫体肌肉组织、冬虫夏草的子座菌丝体或冬虫夏草的子座表皮层 中的至少4种;
所述的苏木精-伊红-碘液染色方法为:滴加苏木染液10min染色后水洗5min,然后依 次分别用50%、75%、95%乙醇梯度洗,然后滴加伊红染液染色5min,然后滴加碘液染色 5min然后依次分别用50%、75%、95%、100%的乙醇梯度洗涤,后置于二甲苯液中5~10 min以完成染色。
2.鉴别纯冬虫夏草粉的方法,其特征在于:包括以下步骤:
取待检冬虫夏草粉,分别染色制成涂片;所述染色为进行苏木精-伊红-碘液染色和番红- 固绿染色;
将制成的涂片于显微镜下进行显微观测,如每片均能清晰观察到冬虫夏草的特有结构, 且没有观测到明显的植物组织或没有碘液染色下的明显蓝色斑点,即可判断为纯冬虫夏草粉, 否则为不纯的冬虫夏草粉;所述的冬虫夏草的特有结构为冬虫夏草的虫体菌丝体、冬虫夏草 的虫体表皮层、冬虫夏草的虫体肌肉组织、冬虫夏草的子座菌丝体或冬虫夏草的子座表皮层 中的至少4种;
所述的苏木精-伊红-碘液染色方法为:滴加苏木染液10min染色后水洗5min,然后依 次分别用50%、75%、95%乙醇梯度洗,然后滴加伊红染液染色5min,然后滴加碘液染色 5min然后依次分别用50%、75%、95%、100%的乙醇梯度洗涤,后置于二甲苯液中5~10 min以完成染色;
所述的番红-固绿染色方法为:将涂片用50%乙醇浸泡后滴加番红染液25min染色,然 后依次分别用50%、75%、95%乙醇梯度洗涤,然后滴加固绿染色1min,然后依次分别用 95%、95%、100%、100%的乙醇梯度洗涤,后置于二甲苯与100%乙醇混合液中5~10min, 再置于纯二甲苯液中5~10min以完成染色。
3.根据权利要求1或2所述的鉴别纯冬虫夏草粉的方法,其特征在于:鉴别冬虫夏草的 特有结构时,以用同种方式染色的具有冬虫夏草特有结构的标准切片为参考标准。
4.根据权利要求3所述的鉴别纯冬虫夏草粉的方法,其特征在于:对每批待检的纯冬虫 夏草粉物料取样4-10份分别制成涂片。
5.根据权利要求4所述的鉴别纯冬虫夏草粉的方法,其特征在于:对每批待检的纯冬虫 夏草6张涂片中的每1张上都要有至少4种特有结构才为真品。
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