[发明专利]利用食药用菌生产FGFs的方法

权利要求书

1.一种含FGFs的食药用菌，其特征在于，它是通过以下方法获得的：

1)以hFGFs基因为模板，按照植物偏好的密码子将hFGFs碱基序列重新改造，并在人工合成的引物中分别引入了Kpn I、Bgl II及凝血酶酶切位点，采用PCR搭桥法合成FGFs全长基因，酶切后插入pUC19载体，得植物偏好型质粒pUC19FGFs；

2)FGFs全长基因插入到含有CaMV35S启动子和甘露糖选择标记PIM的质粒pCABIM1390中，获得食药用菌达载体p1390-35S-PIM-FGFs；

3)利用冻融法将质粒p1390-35S-PIM-FGFs转入农杆菌中；

4)用农杆菌介导的方法进行侵染食药用菌丝体，获得含FGFs的食药用菌。

2.根据权利要求1所述的一种含FGFs的食药用菌，其特征在于：所述的食药用菌为金针菇、猴头或灵芝菌的菌丝体或子实体。

3.根据权利要求1或2所述的一种含FGFs的食药用菌，其特征在于：所述的人工合成的引物为：

P1：CGGAATTCATTGAGGGAAGAGCTAACTACAAGAAGCCAAAG

P2：GGAAGATCTTTAATCAGAAGAAACTGGCAATGG或

P3：CGGAATTCCTTGTTCCACGTGGATCTCCAGCTTTGCCAGAGGATGG

P4：GGAAGATCTTTAAGACTTAGCAGACATTGGC

或

P5：CGGGATCCGAATTCCCATGGATTGAGGGAAGGTGCAAC

P6：GCGGTACCACTAGTAGATCTTTAAGTAATAGCCATTGG。

4.植物偏好型FGFs基因，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示，或SEQ ID NO.3所示，或SEQ ID NO.5所示。

5.利用食药用菌生产FGFs的方法，其特征在于：将权利要求1、2或4所述的一种含FGFs的食药用菌，经提取、分离FGFs融合蛋白，并用凝血酶酶切、纯化。

6.一种含FGFs的食药用菌在化妆品生产和饲料添加剂以及制备治疗人和动物机体损伤药物中的应用。

7.一种治疗皮肤粘膜损伤的药物，其特征在于：是权利要求1、2或4所述的一种含FGFs的食药用菌的冻干粉和蒸溜水，按重量1∶1比例，研磨匀浆后，煮沸3min制成胶体状食药用菌冻干粉水溶液。

8.根据权利要求7所述的一种治疗皮肤粘膜损伤的药物，其特征在于：所述的含FGFs的食药用菌为含FGFs的金针菇菌丝体或子实体。