[发明专利]一种基于化学发光的痕量蛋白快速检测方法

权利要求书

1.一种基于化学发光的痕量蛋白快速检测方法，主要步骤为：

1)待测蛋白与酶标抗体的反应形成免疫复合物；

2)抗体修饰的磁性微纳粒子与上述免疫复合物反应，形成双抗体夹心复合物；

3)在磁场中对双抗体夹心复合物洗涤，去除多余酶标抗体。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述酶标抗体中的酶是辣根过氧化酶或碱性磷酸酶。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其中，所述辣根过氧化酶对应的底物体系为鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酰肼)或其衍生物过氧化氢发光体系，在425nm时探测其光信号；

碱性磷酸酶对应的底物体系是1，2-二氧杂环丁烷类底物体系，在470nm时探测其光信号。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述步骤1和步骤2的反应均于37℃恒温中进行，步骤1的反应时间是10～25分钟，步骤2的反应时间是3～8分钟。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述磁性微纳粒子为铁磁性超顺磁材料中的一种或几种组合而成。

6.根据权利要求1或5所述的检测方法，其中，所述磁性微纳粒子的粒径在10nm～3000nm。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述待测蛋白的体积是30～60μL，酶标抗体的体积是30～60μL，所需生物功能化的磁性微纳粒子的体积是10～50μL。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述对双抗体夹心复合物洗涤的缓冲液组成为：8-10mM的磷酸盐缓冲液，pH＝7.4，体积百分含量为0.02-0.05％的吐温-20。