[发明专利]鸡多重病毒核酸探针斑点杂交检测试剂盒

权利要求书

1.一种鸡多重病毒核酸探针斑点杂交检测试剂盒，其特征在于该试剂盒含有：

1)分别经狄高辛标记的如序列3、序列6、序列9、序列12及序列15所述的核酸序列的MDV-pp-38核酸探针、REV-pol核酸探针、CAV-vp₁核酸探针、ARV-Sigma c核酸探针和IBV-N核酸探针；

2)未经标记的作为对照用如序列3、序列6、序列9、序列12及序列15所述的核酸序列的MDV-pp-38基因DNA、REV-pol基因DNA、CAV-vp₁基因DNA、ARV-sigma c基因DNA和IBV-N基因DNA；

3)硝酸纤维膜、封闭试剂、碱基磷酸酶标记的抗狄高辛抗体、NCPI溶液、NBT溶液和20×SSC溶液。

2.一种鸡多重病毒核酸探针斑点杂交检测试剂盒制备方法，其特征在于分别利用I型鸡马立克氏病毒特异性的pp38基因、禽网状内皮增生病病毒的pol基因、鸡传染性贫血病毒的vp₁基因、禽呼肠孤病毒的sigma c基因、鸡传染性支气管炎病毒N蛋白基因为模板，用各自对应的特定引物通过PCR合成了经狄高辛标记的特异性核酸探针，通过斑点分子杂交，这些探针将可用于检测病料样品中某种病毒特异性核酸的存在。

3.如权利要求2所述一种鸡多重病毒核酸探针斑点杂交检测试剂盒的方法，其特征在于在用PCR合成经狄高辛标记的MDV-pp-38核酸探针、REV-pol核酸探针、CAV-vp₁核酸探针、ARV-sigma c核酸探针和IBV-N核酸探针分别使用了序列1、2，序列4、5，序列7、8，序列10、11和序列3、14所述的核酸序列作为引物。

4.如权利要求2所述一种鸡多重病毒核酸探针斑点杂交检测试剂盒的方法，其特征在于用PCR合成经狄高辛标记的MDV-pp-38基因DNA、REV-pol基因DNA、CAV-Vp₁基因DNA、ARV-sigma c基因DNA和IBV-N基因DNA分别使用序列1、2，序列4、5，序列7、8，序列10、11和序列3、14所述的核酸序列作为引物。