[发明专利]一种具有酸敏性的血根碱脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种血根碱脂质体的制备方法，采用本发明方法制 备的血根碱脂质体具有酸敏性。

背景技术

血根碱发现于19世纪初，分子式为C₂₀H₁₄NO₄，相对分子质量为332。作为一种卞基异喹 啉类生物碱，具有一系列广泛的抗细菌、抗真菌、抗感染的特性。近期研究表明，血根碱对 人类多种癌症细胞具有良好的抑制活性，它可通过抑制内皮生长因子减少癌细胞周围血管增 生，在微摩尔浓度就能抑制癌细胞生长而不影响正常细胞，并能有效地阻断多数肿瘤细胞 MDR(多药耐药效应)，因此有望在临床肿瘤治疗方面发挥作用。详见(Mackraj，Thirumala Govender，Prem Gathiram.Sanguinarine[J].Cardiovascular Therapeutics，2008，26：75-83) (Haseeb Ahsan，Shannon Reagan-Shaw，Jorien Breur，Nihal Ahmad，Sanguinarine induces apoptosis of human pancreaticcarcinoma AsPC-1and BxPC-3cells via modulations in Bcl-2family proteins [J].Cancer Letters，2007，249(2)：198-208.)

该药和大多数肿瘤药物一样具有毒性，人体不良反应有恶心呕吐，肢体肿胀红斑，心脏 衰竭等，因此有必要选择适合的给药系统以降低其毒性，提高其体内疗效。脂质体作为一种 具有生物降解性和生物相容性的载药系统，是抗癌药物首选的一种给药系统。

脂质体虽然具有降低抗癌药物全身毒副作用、提高疗效等一系列优点，但也存在易被RES 系统清除、靶向性不足、免疫原性等众多问题。其中之一是：大多数普通脂质体是以内吞方 式进入细胞，首先存在于核内体(endosome)中，然后在微管系统的介导下被运送至溶酶体 (lysosome)，在溶酶体中，脂质体及其所包含的活性成份被降解，因而直接导致抗癌药物的损 失。

人体血液的pH值为7.4，肿瘤组织的pH值约为6.5，而核内体的pH值约为5.5，如果脂质体 能被核内体较低的pH所触发，将其所包含的活性成份释放出来，逃逸到细胞质中，就可以避 免药物被溶酶体所破坏，从而提高疗效。

酸敏脂质体就是利用上述pH的差异，触发脂质体内活性成份释放到细胞质中，避免被溶 酶体降解的一种功能性脂质体。目前，酸敏性脂质体主要有两种原理，一种是应用pH敏感性 类脂，如DOPE、油酸、半琥珀酸胆固醇等；另一种是应用pH敏感性的聚电解质结合于脂质 体表面，如聚(2-乙基丙烯酸)等。这些物质的构象随着pH而改变，引发脂质体膜不稳定、聚 集、融合、释放内容物。

发明内容

本发明公开了一种具有酸敏性的血根碱脂质体的制备方法。

我们在采用铵盐梯度法制备血根碱脂质体的过程中发现：采用常规的硫酸铵盐，所得到 的血根碱脂质体没有酸敏性；而采用枸橼酸铵盐，所得到的血根碱脂质体却具有酸敏性，这 明显有利于提高血根碱的抗肿瘤作用。

本发明的制备方法包括：将磷脂、胆固醇溶于有机溶剂，减压蒸发去除有机溶剂，加入 枸橼酸铵水溶液水合形成混悬液，匀化，透析，再与血根碱水溶液孵化即得。其中所述有机 溶剂优选氯仿、二氯甲烷、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮中的一种或几种。更优选氯仿、甲醇、 二氯甲烷或乙醇。

本发明的制备方法还可以是：将磷脂、胆固醇溶于有机溶剂，搅拌条件下滴入枸橼酸铵 水溶液，减压蒸发除去有机溶剂，匀化，透析，再与血根碱水溶液孵化即得。有机溶剂优选 乙醇或乙醚。

本发明中所述磷脂优选大豆磷脂。

本发明所涉及的比例均为摩尔比。

本发明中，血根碱与磷脂、胆固醇的配比直接影响到脂质体的质量，制备过程中使用的 枸橼酸铵的浓度对其质量也有影响。

当固定处方和制备过程中的其他参数不变，仅考察药物和磷脂的比例时，血根碱脂质体 的平均粒径和包封率如表1所示。

表1.血根碱/磷脂的比例对脂质体粒径和包封率的影响(n＝3)