[发明专利]大鲵低聚糖肽、制备方法及其在化妆品中的应用

说明书

技术领域：

本发明涉及一种以大鲵(Andrias davidianus)黏液为原料所制备的低聚糖肽、 制备方法及其在化妆品中的应用。

背景技术：

大鲵(Andrias davidianus)是我国特有的珍稀特产，属国家二类保护动物。 主要分布于长江中上游、珠江中上游及汉水上游的溪流中。上世纪90年代以来， 湖南、湖北、陕西及广西都建立了大量的大鲵驯养繁殖企业，仅湖南省就有大 鲵驯养繁殖企业35家左右，年繁殖能力已达4～5万尾。随着养殖规模的发展， 大鲵资源的精深加工利用成为一个关系大鲵产业持续发展的紧迫课题。

目前，相关报道都是利用大鲵的皮、骨以及肉来进行加工利用，如中国专 利号ZL 200510136627.0公开了大鲵保健食品及其生产方法；中国专利申请号 200510136629.X公开了大鲵美容护肤品及其制备方法，均需要宰杀大鲵，不仅 破坏大鲵资源，而且其产品成本较高。大鲵黏液是大鲵皮肤特有的分泌物质， 利用塑胶刀片小心刮取，即可收集到大鲵黏液。但迄今为止，还没有关于以大 鲵黏液为原料制备出低聚糖肽以及制备方法和其在化妆品中应用的相关报道。

发明内容：

本发明的目的是提供一种以大鲵(Andrias davidianus)黏液为原料所制备的 低聚糖肽、制备方法及其在化妆品中的应用。

本发明的技术解决方案是：一种大鲵低聚糖肽，其特征在于分子量小于 4000Da，糖链通过GalNAc连接到丝氨酸或苏氨酸上，具有-Galβ1-3GalNAc α-O-Ser/Thr结构。

大鲵低聚糖肽所含氨基酸的摩尔百分含量为：天冬氨酸与天冬酰胺11.2％， 苏氨酸13.1％，丝氨酸0.2％，谷氨酸与谷氨酰胺12.5％，脯氨酸8.9％，甘氨酸 2.4％，丙氨酸8.5％，缬氨酸5.7％，异亮氨酸3.6％，亮氨酸8.0％，酪氨酸3.1％， 苯丙氨酸4.7％，组氨酸2.6％，赖氨酸5.3％，精氨酸6.5％，甲硫氨酸2.5％，半 胱氨酸1.2％；含糖量为总质量的20～60％，相对湿度不大于10％，溶解度为1 克/30毫升水。

一种上述大鲵低聚糖肽的制备方法，其特征在于按如下步骤进行：

a.将大鲵黏液在0～10℃时进行匀浆；

b.向匀浆中加入1～3倍体积pH 7～8的0.01～0.1M磷酸缓冲液及与匀浆质量 比为0.1～1％的复合酶，酶解12～48h；所述复合酶为将海洋碱性蛋白酶、木瓜蛋 白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶按活力单位比为3∶3∶2∶2比例混合；

c.离心取上清，采用截留分子量为4000Da以下的超滤膜分离器分离，取 透过超滤膜的液体；

d.通过Sephadex LH-20分子筛层析柱，收集OD_280nm吸收峰；

e.将所收集的液体通过大孔吸附树脂及活性炭后冷冻干燥，制得大鲵低聚 糖肽。

一种上述大鲵低聚糖肽在制备化妆品中的应用。

在所述化妆品基料中掺入总质量0.1～10％的大鲵低聚糖肽。

本发明是以大鲵(Andrias davidianus)黏液为原料制备低聚糖肽，所得的低 聚糖肽具有显著提高单核细胞吞噬细菌的能力，且具有增强单核细胞活力及促 进抗体形成的能力。其相对湿度不大于10％，溶解度为1克/30毫升水，可做为 活性物质加入到化妆品中，具有较好的相溶性。因其在光谱特性方面还具有抗 紫外线能力，对皮肤极为有利。因大鲵(Andrias davidianus)黏液具有再生性， 无需宰杀即可获得，既不危害大鲵的生长繁殖，又可实现大鲵资源的持续利用。

附图说明：

图1是本发明实施例时间飞行质谱图。

具体实施方式：

实施例1：

a.收集大鲵黏液，将大鲵黏液在0～10℃时用匀浆机进行匀浆；

b.向所得到的匀浆中加入1～3倍体积pH 7～8的0.01～0.1M磷酸缓冲液及与 匀浆质量比为0.1～1％的复合酶，酶解12h～48h；所述复合酶为将海洋碱性蛋白 酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶按活力单位比为3∶3∶2∶2比例混合；

c.离心取上清，采用截留分子量为4000Da以下的超滤膜分离器分离，取 透过超滤膜的液体；