[发明专利]一种胶体金免疫层析定性定量两用检测HCG试纸

说明书

技术领域

本发明属体外免疫诊断试剂领域。

背景技术

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是由绒毛合体滋养细胞分泌的一种糖蛋白激素，囊胚期着床后即开始产生。于卵细胞受精的7-10天即可在孕妇的尿液中检测出HCG，此后随着孕期的增加HCG的浓度将迅速增高，倍增时间为1.98天。异位妊娠尿HCG上升较缓慢，若怀孕的最初3-6周，HCG不能持续以每天66％的速度递增，应考虑异位妊娠或先兆流产的可能性。故尿HCG动态定量检测可作为异位妊娠随访监控指标，对早期异位妊娠的诊断具有重要意义。

目前，临床上主要通过超声波检查、HCG放射免疫测定、后穹窿穿刺、诊断性刮宫、腹腔镜等技术对异位妊娠进行诊断，但上述方法都需要特殊的仪器设备，对操作人员和环境也有一定的要求，普遍应用受限。现有的胶体金免疫层析技术以其简便、快速的优势已经在临床医学检验中占据一席之地，通过该方法测定HCG也早已广泛应用于早孕的检查及异位妊娠的诊断。常规HCG定性检测卡由两条线组成，由下至上分别为检测线、质控线。测定时，若检测线和质控线均出现红色可判定为阳性，若仅质控线出现红色为阴性，质控线不显色则为无效。

但是，目前的胶体金免疫层析技术定性检测HCG也有其局限性，典型的如，文献《尿HCG动态定量测定的临床意义》(中国当代医学，2005年3月第3卷第3期，第20-21页)和文献《尿HCG动态定量监测早孕的临床意义》(武警医学，2003年9月第14卷第9期，第543-545页)使用了一种GuanGold^TM检测板及稀释液，其检测HCG的反应原理是基于免疫层析夹心原理的一种快速一步法免疫检测，该法采用纯化的单一克隆抗体以胶体金标记成金标联结物和包被到膜基上的多克隆抗体作为夹心捕捉物，标本加入检测板，若标本中含有HCG，那么这些抗原与金标联结物结合，该结合物沿膜基迁移通过测定时，被多克隆抗体捕获，而在膜基上形成一条暗红色线条；若标本中不含HCG或HCG含量不同，所产生的暗红色线条的色泽亦不同。随着HCG含量的增加，暗红色的色泽愈深。免疫反应后利用SC一1金标试条定量测定仪来测定检测板检线的色泽密度，能够定量测定出标本中的HCG含量。试剂的最低检出浓度为10IU/L，最高检出浓度为800IU/L。然而，由于HCG变化相当大，故两篇现有技术文献均指出该试剂在使用中必须先对检测样品进行一定的稀释。现有技术的最高检测范围有限的原因是，在高浓度HCG样品的检测结果中，容易出现“倒钩效应(hook effect)”，即样品HCG检测浓度在达到最高检测范围的上限后，HCG的测得值反而随浓度上升而下降，在临床诊断上，造成血中HCG低水平的误判，而当这种病人的血清稀释后进行检测，则会发现其HCG水平实际很高，使对病人的治疗出现意想不到的问题。这种倒钩效应的存在，使“高浓度HCG样品的检测必须通过稀释实现”成为本领域的一种共识。

由于试纸设计中必须考虑使定量检测的上限尽量提高，故常常会使检测下限相应提高而牺牲了试纸的灵敏度，而这对在同一张试纸上实现定性检测是不利的，因为定性试纸着重于要求比较低的检测下限，如：25IU/L，以保证灵敏度。所以，现有技术中的检测试纸难以在同一种试纸上实现定性和定量检测。

发明内容

本发明所解决的技术问题

本发明在上述现有HCG试纸定量检测试纸的基础上，提供一种胶体金免疫层析定性、定量两用HCG检测试纸，不但克服现有定量检测试纸因HCG含量过高而产生的倒钩现象，而且检测范围达到100～15000IU/L，避免了对检测样品进行预先稀释所可能带来的不便和差错，检测精度高、变异系数小。在实现定性检测的同时，通过配套相应的定量检测仪实现定量检测。

技术方案

本发明的第一个方面是提供一种胶体金免疫层析定性定量两用HCG检测试纸，包括：

散布有胶体金标记的HCG单克隆抗体复合物的结合垫；和

分析膜，所述的分析膜上按层析流向依次定点分布有含HCG单克隆抗体或羊抗鼠IgG抗体的定性线、质控线和定量线；

其中，所述的HCG检测试纸在用于定性检测时灵敏度可达25IU/L，且在不稀释待测样品下定量检测线性范围为100～15000IU/L。