[发明专利]一种能无限自我更新的神经干细胞、其制备方法及其用途

权利要求书

1.一种神经干细胞，其特征在于同时表达标志蛋白Oct4和Sox1，并可在体外快速增殖和稳定传代。

2.根据权利要求1所述的神经干细胞，还同时表达Sox2、Nestin和Pax6。

3.一种分离、体外培养权利要求1的神经干细胞的方法，其包括如下步骤：无菌条件下获得从动物的胎儿脑组织，用胰酶消化分散后，用含添加ROCK信号通路抑制剂和GSK/3信号通路抑制剂的神经细胞培养液培养至有神经球样细胞悬浮，将悬浮细胞继续消化传代培养，收集继续存活的少数表达Oct4和Sox1的细胞，收获所述细胞，即得到神经干细胞。

4.一种分离、体外培养权利要求1的神经干细胞的方法，其特征在于使用分化液为添加ROCK信号通路抑制剂和GSK/3信号通路抑制剂的神经细胞培养液对动物的神经细胞ES进行定向分化，包括步骤：在所述分化液环境中将ES细胞贴壁分化，至表达Sox1的细胞开始聚集悬浮成神经球时收集悬浮的神经球，使之在Laminin上继续贴壁培养，通过贴壁、悬浮、再贴壁的方式进行细胞富集，收集富集得到的细胞，即得到神经干细胞。

5.权利要求1-4中任一项的神经干细胞，其来自人、大鼠、小鼠、狗、兔或猴子。

6.权利要求3或4的方法，其中使用N2B27基础培养液作为基础细胞培养液，ROCK信号通路抑制剂是Y27632，GSK/3信号通路抑制剂是CHIR99021。

7.权利要求1-2所述的神经干细胞在制备治疗神经退行性疾病的药物中的用途。

8.权利要求7的用途，其中所述神经退行性疾病选自下述疾病中的一种：帕金森氏症、老年痴呆症、脑中风和退行性心脏病。

9.权利要求1-2所述的神经干细胞在制备治疗脊髓损伤的药物中的用途。

10.权利要求1-2所述的神经干细胞在制备神经元和神经胶质细胞中的用途。