[发明专利]顺丁烯二酸酐类化合物在制备抗灰霉病的杀菌剂中的应用

说明书

(一)技术领域

本发明涉及顺丁烯二酸酐类化合物在制备抗灰霉病的杀菌剂中的应 用

(二)背景技术

半知菌亚门葡萄孢属灰葡萄孢(Botrytis cinerea)分生孢子梗直或屈 曲，无色，光滑，分枝，分枝末端常明显膨大，形成无色或淡色的瓶状产 孢细胞。产孢细胞多芽生，分生孢子椭圆形，单孢，无色或灰色，聚集成 堆成灰色，通常产生黑色不规则的微菌核。由灰葡萄孢引起的灰霉病是一 种植物病害，灰葡萄孢能在生产期和收获后运输期侵染多种经济作物，包 括鲜果类植物草莓、葡萄、苹果、柑橘等；蔬菜类番茄、黄瓜、甘蓝、莴 苣等；观赏植物郁金香、秋海棠、天竺葵、菊花等。灰霉病的发生会引起 大面积植物死亡，造成严重的经济损失。

据现有资料报道，多种以顺丁烯二酸酐结构为核心结构的天然化合物 在杀菌、除草方面表现出了很强的生物活性，其中Scytalidin、Heveadride 和Dihydroepiheveadride具有良好的抗真菌谱，Cornexistin和 Hydroxycornexistin已经被开发为高效除草剂。但是目前顺丁烯二酸酐类 化合物抗灰霉病的例子很少，研究较多的只有日本开发的Zopfiellin。

(三)发明内容

本发明目的是提供顺丁烯二酸酐类化合物在制备抗灰霉病的药物中 的应用。

本发明采用的技术方案是：

顺丁烯二酸酐类化合物在制备抗灰霉病的杀菌剂中的应用，所述顺丁 烯二酸酐类化合物为下列之一：

上述化合物均含有下述顺丁烯二酸酐活性结构：

化合物的抗菌活性受pH变化影响，在酸性环境中表现出较高的生物 活性，其生物活性在pH4.5～5.0的条件下达到最高。

具体的，所述顺丁烯二酸酐类化合物用于制备抗灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的灰霉病的制剂。

本发明采用菌丝生长速率法测定顺丁烯二酸酐类化合物对灰葡萄孢 的半抑制浓度(EC₅₀)和最小抑制浓度(MIC)，结果显示变构霉素，二 甲基马来酸酐和联苯基马来酸酐的生物活性较好。这三种化合物的EC₅₀分别为14.89μg/mL，23.15μg/mL，66.36μg/mL；MIC分别为125μg/mL， 180μg/mL，160μg/mL，这些化合物的生物活性在pH4.5或pH5.0时达 到最高。在抑制孢子萌发实验和离体叶片防效试验中，顺丁烯二酸酐类化 合物也表现出了对灰霉病较好的防治效果，可以作为防治灰霉病的新型杀 菌剂开发。

附图说明

图1为pH变化对变构霉素、二甲基马来酸酐、联苯基马来酸酐生物活性 的影响实验结果。

(四)具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围 并不仅限于此：

实施例1：顺丁烯二酸酐类化合物对灰霉病病原菌的抑制实验

采用菌丝生长速率法测定顺丁烯二酸酐类化合物对灰霉病病原菌菌 丝生长的抑制率。将顺丁烯二酸酐类化合物加入PDA培养基，制成不同浓 度的含药培养基。将在PDA培养基上预培养的灰霉病菌落边缘打直径 6mm的菌块，接于含顺丁烯二酸酐类化合物系列浓度的平板上，以无药 平板为对照，每次处理重复3次。21℃恒温培养2～3d，待对照培养基中 灰霉菌菌落长满，用十字交叉法测量各平板菌落生长直径。每次处理设三 次重复。菌丝生长抑制率计算公式(长度单位：mm)如下：

表1：顺丁烯二酸酐类化合物对灰霉病病原菌的抑制实验结果

实施例2：pH变化对变构霉素、二甲基马来酸酐、联苯基马来酸酐生物 活性的影响实验

采用菌丝生长速率法测定pH的变化对变构霉素、二甲基马来酸酐、 联苯基马来酸酐生物活性的影响。将样品加入PDA培养基，制成不同pH 的含药培养基。将在PDA培养基上预培养的灰霉病菌落边缘打直径6mm 的菌块，接于不同pH的含药平板上，以对应pH的无药平板为对照，每次 处理重复3次。21℃恒温培养2～3d，待对照培养基中灰霉菌菌落长满，用 十字交叉法测量各平板菌落生长直径。每次处理设三次重复。菌丝生长抑 制率计算公式(长度单位：mm)如下：