[发明专利]一种沙棘叶黄酮苷元的生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及黄酮苷元的生产方法，具体涉及一种沙棘叶黄酮苷元的生产方 法，即利用微生物发酵的技术从沙棘叶中获取黄酮苷元的方法。

背景技术

近年来，很多体内和体外实验都表明黄酮类化合物有很多的生物功能，包 括抗炎症、抗过敏、抗癌、抗高血压、抗关节炎和抗菌活性，降低慢性疾病如 心血管疾病，治疗皮肤病，防止血小管凝集抗过敏作用、抗肿瘤等。沙棘叶中 含有丰富的黄酮类物质，其含量远高于果实中黄酮的含量，并且叶片的低油脂 含量也使得其成为黄酮的优质来源；另一方面，沙棘叶来源广泛，从未被充分 利用。目前，国内有利用沙棘叶提取黄酮的，但是没有人关注其产物的构型和 生理活性高低。

通常，黄酮糖苷的生理活性低于黄酮苷元，黄酮苷元比黄酮糖苷具有更高 的生物利用率。人体实验表明，黄酮主要在肠道中被吸收，脂溶性的苷元可从 小肠直接吸收；糖苷型的黄酮小部分可以通过结肠中的细菌、微生物的β-葡萄 糖苷酶或β-半乳糖苷酶作用而水解，生成的产物又进一步被细胞降解，生成苷 元，被结肠壁吸收入血，大部分被肠腔内微生物通过杂环裂解方式降解和代谢 而损失掉。即黄酮苷元比黄酮糖苷具有更高的生物效价。有研究表明，在人体 内，苷元型的大豆异黄酮比糖苷型吸收更快，被吸收量更多。另外，由于黄酮 苷元更容易被吸收，其各种生物活性功能也更强。高荣海等发现小鼠对大豆异 黄酮苷元吸收效果强于大豆异黄酮糖苷，大豆异黄酮苷元免疫功能优于大豆异 黄酮糖苷。因此，生产黄酮苷元具有更为明显的意义。

所谓微生物转化是利用微生物细胞中的酶高效地、选择性地催化一种化学 成分进行某种化学反应，以获得具有高活性成分的过程。利用微生物发酵液中 的代谢酶转化糖苷型黄酮为苷元形式的黄酮不仅可以降低成本，而且具有反应 条件温和，大豆异黄酮苷元不易变性等优点，因此成为近年来许多学者研究的 热点之一。

目前研究最多的是大豆异黄酮，大豆制品发酵过程中能分泌β-葡萄糖苷酶 的微生物，主要是曲霉、根霉、毛霉和酵母等真菌，尤其是根霉属(吴定，江汉 湖，发酵大豆制品中异黄酮形成及其功能，中国调味品，2001(6)：3-6)。申请号 为200610134132.9、发明名称为微生物酶法制备大豆异黄酮苷元的方法的专利 申请中以大豆异黄酮粉为原料，用培养米曲霉菌发酵制备的β-葡萄糖苷酶能使 大豆异黄酮苷转化率达到90％以上，生物利用率明显提高。王振丽(王振丽， 利用微生物代谢酶转化大豆异黄酮的研究，沈阳农业大学，2007)筛选了产胞 外β-葡萄糖苷酶活力较高的菌株LWQ-0508。王秀伶等(王秀伶，邵建柱，朱 宝成等，大豆异黄酮微生物转化菌株的筛选与鉴定，河北农业大学，2006)以 氢黄豆苷元为底物，分离出了能转化二氢黄豆苷为100％S-型雌马酚的革兰氏 阴性细菌菌株。在其他黄酮类化合物的转化方面，申请号为03153489.9、发明 名称为银杏黄酮甙元的生产方法的专利申请公开了一种银杏黄酮苷元的生产方 法，采用微生物菌株或生物酶作用原料中黄酮糖苷的生物转化技术提高产物中 黄酮苷元含量。

在其它天然化合物的生物转化方面，研究也十分活跃。目前有通过酶的作 用对沙棘黄酮进行构型转化，但是酶解法转化中催化剂是昂贵的糖苷水解酶， 成本高，不利于工业化生产。因此应该更多考虑微生物进行转化。微生物在常 温、常压等较为温和的条件下进行糖苷的转化，能最大限度保护原料中化学成 分免遭破坏，为绿色环保技术，能够在最小成本下获得最大利益。但是，目前 尚未见关于沙棘黄酮微生物发酵转化的研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种沙棘叶黄酮苷元的生产方法，利用微生物转化 技术提高苷元型沙棘黄酮的含量，从而提高沙棘黄酮的生理活性和最终产品中 苷元型黄酮的含量。本发明利用黑曲霉对沙棘叶黄酮进行转化，即利用黑曲霉 代谢产生的聚乳糖醛酸酶等对糖苷型黄酮进行酶解，最后生成槲皮素、山奈酚 和异鼠李素等黄酮苷元。本发明所采用的为食源性微生物，转化产物可以直接 用于食品。

一种沙棘叶黄酮苷元的生产方法，按照如下操作步骤进行：