[发明专利]牛尾菜甾体皂苷提取物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，涉及牛尾菜甾体皂苷提取物及其制备方法，还涉及牛尾菜甾体皂 苷提取物在制备预防和/或治疗类风湿性关节炎产品中的用途。

背景技术

类风湿性关节炎是一种常见的以关节组织慢性炎症性病变为主要表现的自身免疫性疾 病。其主要的病理变化为关节滑膜细胞浸润，滑膜翳形成，软骨与骨组织的侵蚀。类风湿性 关节炎治疗的目的是阻止病程发展，即阻止关节炎症和破坏进程，预防功能丧失。虽然治疗 措施很多，但药物治疗仍是基础。目前治疗药物包括非甾体抗炎药、甾体抗炎药和疾病调修 抗风湿病药，但这些药物均存在明显的不良反应。随着对炎症过程、分子遗传学和生物技术 发展，对病原学机制的认识不断深入，研究者努力寻找具有特异性的治疗药物。主要以炎性 细胞因子为靶点、以炎症介质为靶点、以免疫活性细胞表面抗原为靶点、以信号转导通路为 靶点。

百合科菝葜属植物牛尾菜Smilax riparia A.DC的根和根茎资源丰富，具有补气活血，舒 筋通络之功效，主治气虚浮肿，筋骨疼痛，偏瘫，头晕头痛，咳嗽吐血，骨结核，白带[江苏 新医学院.中药大辞典，上海科学技术出版社，1985：427.]。Sashida Y等从牛尾菜中分离 鉴定了2个甾体皂苷类化合物新替告皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖 苷，新替告皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖 苷][Sashida Y，et al.Phytochemistry，31(7)：2439-2443.]；Li J等从牛尾菜中分离鉴定了 2个甾体皂苷类化合物3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡 萄糖-3β，20α-二醇-5α-呋甾-22(23)-烯-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，3-O-α-L-吡喃鼠李糖基 -(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖-3β，16β-二醇-5α-孕甾-20-酮-16-O-[5-羟基 -4-甲基-戊酸-5-O-β-D-吡喃葡萄糖酯][Li J，et al.Chem Pharm Bull，54(10)：1451-1454.]。 目前未见高含量牛尾菜甾体皂苷提取物的产品；未见有关牛尾菜甾体皂苷在预防和/或治疗类 风湿性关节炎生物活性方面的研究报道。

发明内容

本发明的目的是开发利用迄今为止应用尚不广泛的百合科菝葜属植物牛尾菜Smilax  riparia A.DC，尤其是其甾体皂苷类成分。

本案发明人通过对牛尾菜进行细致深入的研究，发明了牛尾菜甾体皂苷提取物提取分离 纯化方法，进一步对提取物化学成分进行了研究，分离鉴定了提取物中含量高的化合物4种， 均为新化合物，制得的提取物经药理活性研究证明，具有抗类风湿性关节炎作用，因而完成 了本发明。

本发明提供一种牛尾菜甾体皂苷提取物及其制备方法和用途。

本发明的牛尾菜甾体皂苷提取物中甾体皂苷重量百分含量为50～95％。

本发明提供牛尾菜甾体皂苷提取物的制备方法，该方法包括以下步骤：

a)牛尾菜粗粉用第一溶剂回流提取，滤过，提取液合并，提取液减压浓缩；

b)将步骤a)获得的提取物加水溶解，经大孔吸附树脂柱色谱，用水洗脱至洗脱液近无 色，弃去洗脱液；

c)用第二溶剂洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液；

d)用第三溶剂洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液；

e)将步骤d)获得的洗脱液，经脱色树脂柱D941色谱，用第四溶剂洗脱，收集洗脱液， 减压浓缩、干燥得牛尾菜甾体皂苷提取物。

在以上步骤中，其中步骤a)的第一溶剂为0～100％乙醇水溶液；步骤b)大孔吸附树脂 包括非极性或弱极性大孔吸附树脂。步骤c)的第二溶剂为10～50％乙醇水溶液，步骤d)的 第三溶剂为60～90％乙醇水溶液，步骤e)的第四溶剂为90％乙醇水溶液。

本发明提供牛尾菜甾体皂苷提取物的制备方法，优选的包括以下步骤：

a)牛尾菜粗粉加50～70％乙醇回流提取，滤过，提取液合并，减压回收乙醇；

b)将步骤a)获得的提取物加水溶解，经大孔吸附树脂柱D101色谱，用水洗脱至洗脱液 近无色，弃去洗脱液；

c)用30％乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液；

d)用70％乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液；