[发明专利]拮抗疫苗中内毒素对畜禽的致热性作用的组合物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种拮抗内毒素致热性作用的组合物，尤其涉及一种 拮抗革兰氏阴性菌疫苗中内毒素对畜禽的致热性作用的组合物，本发 明属于兽药技术领域。

背景技术

内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上一种大分子有机化合物，主要成 分为脂多糖，其结构具有高度的稳定性，160℃需2-4小时才能灭活。

革兰氏阴性菌疫苗在生产过程中常出现因配制工艺或是抗生素 对动物的不当应用引起菌体崩解，导致内毒素释放，使注射动物出现 一系列临床反应，诸如：肿头，肿脸，停食停水，局部炎症，休克， 死亡；生产性能降低；免疫功能下降，易发病，对疫苗应答下降等。

多粘菌素B(PMB)是一种环形阳离子多肽，被认为是惟一具有 抗内毒素作用的抗生素，多粘菌素B与LPS的活性中心Lipid A具有 很高的亲和力，直接与Lipid A的SO4^2-结合，抑制LPS的生物活性， 发挥对内毒素的中和作用。

甘氨酸(Gly)是机体固有的最简单的氨基酸，具有两性游离的 特点，通过其氨基与内毒素结合而改变了内毒素正常结构，也可抑制 内毒素诱导的IL-1、TNF的分泌，降低内毒素与单核细胞的结合率。

有研究报道甘氨酸(Gly)能显著拮抗内毒素的致热性等，能在 一定程度上破坏内毒素的超微结构，从而干扰其活性；而多粘菌素B (PMB)是有效的内毒素拮抗剂。但是，将多粘菌素B和甘氨酸联合 在一起对于革兰氏阴性菌疫苗中的内毒素对畜禽的致热性作用是否 有协同增效的拮抗效果？其安全性如何？迄今为止，尚没有任何文献 对此进行披露。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种能够有效拮抗革兰氏阴性菌疫苗 中的内毒素对畜禽的致热性作用的组合物；

本发明的目的之二是将上述组合物应用于拮抗革兰氏阴性菌疫 苗中的内毒素对畜禽的致热性作用；

本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：

一种能够有效拮抗革兰氏阴性菌疫苗中的内毒素对畜禽的致热 性作用的组合物，该组合物由多粘菌素B和甘氨酸组成；优选的，该 组合物中，多粘菌素B的浓度为200μg/ml，甘氨酸的浓度为 200mg/ml。

本发明通过试验发现，多粘菌素B(PMB)和甘氨酸(Gly)分别 作用于内毒素分子结构中的不同部位，二者联合应用具有较强的内毒 素结合和中和能力，能够有效拮抗仔猪水肿病多价灭活疫苗的内毒素 对于内毒素的拮抗作用，具有协同增效的拮抗效果；此外，两种拮抗 剂同时应用，还可因减少单一拮抗剂的用量而降低药物的毒副作用。

本发明的另一目的是将本发明组合物应用于拮抗疫苗中的内毒 素对畜禽的致热性作用，包括：将本发明组合物加入到疫苗中，混合 均匀；

为了达到更好的拮抗效果，优选的，将本发明组合物加入到疫苗 中至每毫升疫苗中含有多粘菌素B 2-4μg和甘氨酸20-40mg；

更优选的，将本发明组合物加入到疫苗中至每毫升疫苗中含有多 粘菌素B 2μg和甘氨酸20mg。

本发明以小鼠为模型，观察甘氨酸(Gly)与多粘菌素B(PMB) 联用于疫苗后小鼠的临床表现和致死性影响，并确定PMB和Gly联合 拮抗疫苗内毒素上述的最佳配合比例，二者采用上述的最佳比例联用 时能够最为显著的协同拮抗疫苗中内毒素对畜禽的致热性作用。

本发明中所述的疫苗优选为含菌数不低于300×10⁸CFU/ml的革 兰氏阴性菌疫苗，更优选为仔猪水肿病多价灭活疫苗。

附图说明

图1PMB+Gly联用对仔猪的安全性比对试验结果。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点 将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发 明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本 发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改 或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

试验例1 PMB+Gly联用对小鼠毒性的观察试验

一、多粘菌素B与甘氨酸的配制

灭菌生理盐水配制储存浓度为200μg/ml的多粘菌素B和 200mg/ml的甘氨酸，分别用0.22μm的滤膜过滤，置于4℃保存。