[发明专利]一种新的脂质体制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，确切地说它是一种新的脂质体(liposomes)(包括类脂体，niosomes)制备方法。

背景技术

脂质体是由磷脂双分子层形成的闭合囊泡状结构。脂质体根据其结构的不同可以分为单层脂质体(unilamellar yesicles)、多层脂质体(multilamellar yesicles)和多囊脂质体(multivesicular liposomes)。脂质体由英国人Alec D.Bangham在1965年首先发现。此后，人们发现脂质体作为物质载体，尤其是药物载体，有着巨大的应用价值，于是便对脂质体进行了系统而广泛的研究。

经过了二十多年的探索，科研人员已经提出了许多很有价值的脂质体制备方法。目前脂质体主要通过分散技术(dispersion technique)制备，其方法可分为三大类：1)以机械分散技术为基础。如薄膜分散法(film dispersion)，即将用于形成脂质体的磷脂溶于有机溶媒中——通常是氯仿或氯仿和甲醇的混合物，之后在减压的条件下除去溶媒形成干燥的磷脂膜。将磷脂膜水化即可形成多层脂质体(multilamellar vesicles)。该方法虽是最经典、应用最广的方法，但是却存在一些缺点。例如：使用毒性很大的有机溶媒；无法实现工业化生产；当用含药水溶液水化时，形成的多层脂质体(multilamellar vesicles)层与层之间药物分布不均一，必须通过反复冻融处理等。2)以表面活性剂分散技术为基础。如去左污剂透析法，但难以工业化生产，且不适合包封水溶性药物。3)以溶剂或共溶剂(cosolvent)分散技术为基础。例如，逆相蒸发法(reverse evaporation vesicles，REV)，此种制备方法对水溶性药物的包封率及载药量相对较高；而乳剂法制备多囊脂质体(multivesicular liposome)目前可以实现大规模生产(请参见skyepharma的depofoam技术平台)，但是仅限于制备微米级具有缓释功能的多囊脂质体；乙醇注入法(ethanol injection)，已经实现大规模生产(请参见alza公司的技术和polymun的crossflow技术)，可采用被动载药法制备脂质体，但包封率较低，且需要在较高温度下制备(60℃左右)，通常会引起易氧化、易水解和易变性的药物失去活性，而采用主动载药法制备脂质体，包封率虽有所提高，但不适用于对酸碱敏感的药物，同时也容易引起磷脂分解变性。

而概括起来，目前脂质体制备方法主要存在如下缺陷：

1.制剂的稳定性问题。通过已有方法得到的脂质体制剂通常为液体制剂，往往不够稳定，主要表现在如下三个方面：

(1)脂质体属于热力学不稳定分散系。脂质体混悬于水相时，常常会出现聚集、融合等现象，导致粒径变大，严重的还有可能出现分层。

(2)磷脂存在于水相时，通常容易出现水解、氧化等现象。由于磷脂水解后会形成溶血磷脂，一方面增加制剂的毒性，另一方面也容易使脂质体解体，造成被包封药物的渗漏。

(3)脂质体混悬在水相中，在储存过程中，药物可能会渗漏，导致药物包封率改变，从而影响制剂疗效。如果药物本身容易水解，制剂的稳定性问题更显突出。

2.包封率问题。通过已有方法得到的脂质体制剂，水溶性药物包封率往往较低。包封率低不但会造成原料浪费，还可能达不到有效剂量，不能够体现脂质体制剂的优势。目前常用主动载药法(remote loading)来提高水溶性药物包封率。但无论是pH梯度还是硫酸铵梯度主动载药法，均需要在脂质体膜内外提供较大差别的pH环境，不仅不适用于对酸碱敏感的药物，也容易引起磷脂分解变性。此外，主动载药法仅适用于可解离的药物，应用范围相对有限。

3.脂质体制剂灭菌问题。由于磷脂本身的性质，一般不能够对最终的制剂加热灭菌，这样就要求整个生产过程必须采用无菌操作。这对某些脂质体制备工艺来说可能无法实现。

4.脂质体的粒径控制问题。获得小粒径脂质体(小于200nm)通常有利于静脉给药。这是因为：

(1)大粒径的脂质体很容易被体内的单核巨噬系统所吞噬，从而被迅速清除。

(2)小粒径的脂质体可以被动靶向肿瘤组织和缺血心肌。为了获得小粒径脂质体，通常需要对已得到的脂质体进行超声、研磨或挤出。这往往又会导致药物进一步渗漏，影响制剂质量。

5.药物释放问题