[发明专利]一种快速的稚幼鱼甾类激素提取方法无效
| 申请号： | 201010110325.7 | 申请日： | 2010-02-11 |
| 公开（公告）号： | CN102156055A | 公开（公告）日： | 2011-08-17 |
| 发明（设计）人： | 孙鹏;施兆鸿;尹飞;彭士明 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
| 主分类号： | G01N1/04 | 分类号： | G01N1/04;G01N1/28;G01N1/42 |
| 代理公司： | 上海东方易知识产权事务所 31121 | 代理人： | 欧阳俊立 |
| 地址： | 200090 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 幼鱼 激素 提取 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种快速的稚幼鱼甾类激素提取方法，将稚幼鱼组织破碎，再利用乙醇和二氯甲烷将其溶解，其特征在于具体步骤如下：
步骤1、取新鲜的或-20℃冻存的稚幼鱼，称量后剪碎置于研钵中；
步骤2、按照每克鱼重对应1ml 50％乙醇的比例向研钵中加入50％乙醇，充分研磨后将匀浆液转入离心管中；再用上述50％乙醇体积2倍的无水乙醇冲洗研钵中残留的鱼组织，并一同转入离心管中；
步骤3、匀浆采用超声波粉碎15～25秒；并在4℃下，6000～8000转/分钟离心10分钟，收集上清液；
步骤4、将固相残余物与50％乙醇混匀洗涤一次，50％乙醇洗涤用量为每克鱼重应用1ml，再于4℃下，6000～8000转/分钟离心10分钟，收集上清液；
步骤5、将上述两步骤中的上清液汇集，加入上清液5倍体积的二氯甲烷，反复混匀，然后静止分层；
步骤6、用注射器吸除上层的水相，将含有机相的离心管置于通风橱中，45℃水浴，充分挥发有机相；用含有1％BSA的PBS缓冲液充分溶解，并放置于-20℃保持待用。
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