[发明专利]甜菜碱对丙氨酸氨基转移酶的稳定作用及丙氨酸氨基转移酶校准品组合物

说明书

技术领域

本发明属于临床生物化学酶学检验及质量控制领域，特别涉及甜菜碱作为丙氨酸氨基转 移酶稳定剂的应用及丙氨酸氨基转移酶校准品组合物。

背景技术

血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferas，ALT)是临床生化最常用的肝功能检测 项目，在肝病防治中起了积极作用。为保证检测结果的准确性，ALT校准品质控品起着重要 作用，而校准品质控品中ALT酶活性的稳定性就成为重点。但ALT的活性因受时间和贮存温 度等多种因素的影响会发生明显变化，尤其在高温天气，酶活力每小时下降几个单位。目前， 国内外比较常用的ALT的稳定剂多为糖醇类如海藻糖等。但这些稳定剂的添加会使检测系统 产生不同程度的基体效应((matrix effect)，从而影响检测结果。甜菜碱(betaine)又名三甲 基甘氨酸，化学名称为三甲氨基乙内酯，作为一种渗透剂(osmolyte)在自然界中广泛存在。 Stefan Knapp等人(Stefan K，Extremophiles[J]，1999)的研究表明甜菜碱能影响RNaseA 的去折叠热动力学参数从而稳定蛋白酶的天然折叠状态，Dominic Lambert等(Dominic  Lambert，J.Mol.Biol[J]，2007)研究发现甜菜碱等渗透剂能稳定RNA的二级与三级结 构，并稳定RNA-Mg2+的相互作用。本发明提供甜菜碱作为丙氨酸氨基转移酶稳定剂的应用。

目前，国内各个公司提供的检测试剂盒从试剂组成、血清和试剂的用量比例、单双试剂、 检测程序等都会有所不同，造成病人样品检测结果的不一致，给疾病的诊断、治疗、疗效观 察、预防、科研等工作带来了不利的影响。为了使酶测定结果在方法间，实验室间有可比性， 消除参考范围的多重混乱，以利于临床应用，开展酶测定的标准化工作势在必行。由于校准 品在检测体系中基体效应的存在，故目前公认病人新鲜血清才是最好的校准品。由于人血清 中ALT酶活性的不稳定，给新鲜血清的运输和保存形成了极大的不便。本发明另一目的是提 供了一种以甜菜碱为稳定剂的ALT血清校准品组合物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题之一是提供一种稳定血清ALT酶活力的稳定剂甜菜碱，即甜 菜碱对谷丙转氨酶的稳定作用。

本发明所要解决的另一技术问题是提供一种以甜菜碱为稳定剂的ALT血清校准品组合 物，其特征在于所述校准品组合物包括：人血清与甜菜碱，甜菜碱浓度为1mol/L。

甜菜碱对人血清中ALT酶活力有较好的稳定作用，37℃添加甜菜碱的血清可稳定48小时， 25℃添加甜菜碱的血清可稳定4天，这样的稳定效果可很好满足在常温或夏季的高温下短期 运输血清的需要；4℃添加甜菜碱的血清可稳定4周、-20℃添加甜菜碱的的血清可稳定4 个月。

血清中的添加剂对各检测系统会产生不同程度的基体效应(matrix effect)，但基体效 应有绝对性也有其相对性，只要经方法学比较认可某基体效应可被忽略不计或由基体效应对 某检测系统引入的误差在可接受水平即可认为“无”基体效应。在临床常用的几个检测体系 中进行实验，本发明提供的校准品组合物在检测体系中无明显基体效应。

本发明所提供的校准品组合物有很好的稳定效果，尤其是高温下的短期稳定作用，且其 在常用的检测系统中未见明显集体效应，适合用于临床实验室ALT检测的各检测体系的校准。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不 用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可 以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1

稳定实验