[发明专利]携带融合蛋白基因的重组腺病毒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种通过同源重组获得的重组腺病毒，其携带热休克蛋白与癌胚抗原的融合蛋白的编码序列，其特征在于，该腺病毒的基因组缺失E1区和E3区，并且在E1和/或E3区位置插入了所述融合蛋白编码序列的表达盒，该表达盒依次包括：启动子序列、所述融合蛋白的编码序列以及加尾信号序列，其中所述热休克蛋白选自：Hsp70或Hsp70L1。

2.如权利要求1所述的重组腺病毒，其特征在于，所述癌胚抗原选自：人癌胚抗原的全长序列或含人癌胚抗原的第576-669位的片段。

3.如权利要求1所述的重组腺病毒，其特征在于，所述融合蛋白的编码序列从5′至3′依次具有：癌胚抗原编码序列、任选的连接肽编码序列和热休克蛋白编码序列。

4.如权利要求1所述的重组腺病毒，其特征在于，所述腺病毒为Ad5型腺病毒。

5.如权利要求1所述的重组腺病毒，其特征在于，所述同源重组选自：细胞内同源重组；细菌内同源重组；COS/TPC共转染同源重组；或位置特异性重组。

6.一种用权利要求1所述的重组腺病毒致敏的树突状细胞。

7.一种药物组合物，其特征在于，它包括：

(a)有效量的权利要求1所述的重组腺病毒、权利要求6所述的树突状细胞或用权利要求6所述的树突状细胞诱导的T细胞，以及

(b)药学或免疫学上可接受的载体、赋形剂或佐剂。

8.一种制备重组腺病毒的方法，所述重组腺病毒携带热休克蛋白与癌胚抗原的融合蛋白的编码序列，其特征在于，该方法包括如下步骤：

(a)提供基因组中缺失E1区和E3区的复制缺陷型腺病毒；

(b)提供携带热休克蛋白与癌胚抗原的融合蛋白编码序列表达盒的载体；

(c)使步骤(a)的腺病毒与步骤(b)的载体进行同源重组，以获得重组腺病毒。

9.一种制备致敏的树突状细胞的方法，所述方法包括：用权利要求1所述的重组腺病毒或用权利要求8所述的方法制备的重组腺病毒转染树突状细胞。

10.权利要求1所述的重组腺病毒、权利要求6所述的树突状细胞或用权利要求6所述的树突状细胞诱导的T细胞在制备用于预防或治疗CEA阳性肿瘤的药物组合物中的用途。