[发明专利]鬼臼毒素醇质体及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属制药领域，涉及一种鬼臼毒素醇质体；本发明还涉及该醇质体的制备方法。

背景技术

鬼臼毒素(Podophyllotoxin，PPT)是从小檗科植物桃耳七、八角莲或六角莲的根及根茎中提取分离得到的木脂素类化合物，它是世界卫生组织(WHO)推荐使用治疗尖锐湿疣(CA)的一线药物，它的主要作用机理是通过其细胞毒作用使受人类乳头瘤(HPV)感染的细胞死亡，常用的是0.5％的鬼臼毒素酊剂。

CA占我国性传播疾病的第二位，其病因是HPV感染人体后寄居于基底细胞等角质层形成细胞的细胞核内，其DNA可整合到宿主细胞的DNA中并进行表达，因而出现表皮的过度增生甚至癌变。目前CA的治疗主要由冷冻、激光、微波、免疫疗法及外用药物等，临床主要使用的就是鬼臼毒素酊剂。鬼臼毒素酊剂虽然能去除肉眼可见的病变，但过量大面积的使用会产生严重的毒副作用，而脂质体虽然能够减少不良反应，但是其作用也仅限于皮肤表层，所以难以消除皮肤深部的HPV潜伏感染而导致其复发。

2000年，以色列Touitou等的研究小组对另一种新型脂质体——醇质体(Ethosomes)进行了报道，其是在常规脂质体中添加高浓度的醇制备的含醇脂质体。醇质体不仅能够渗入皮肤深部，还能够与细胞膜脂质融合，渗入细胞内部，因此将鬼臼毒素制成醇质体可以达到减少用药量，增加疗效减少复发及毒副作用的目的，具有一定的临床意义。

发明内容

针对现有临床常用的鬼臼毒素酊剂在治疗尖锐湿疣(CA)存在的、会产生严重毒副作用的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种鬼臼毒素醇质体，以提高鬼臼毒素在皮肤内的滞留量，减少全身毒副作用及局部刺激性；本发明所要解决的技术问题还包括提出鬼臼毒素醇质体的制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供的载药醇质体的活性组分为鬼臼毒素，鬼臼毒素包封于醇质体中，所用载药脂质材料为磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺或者二棕榈酰磷脂酰胆碱，鬼臼毒素醇质体粒径范围为50～300nm。

优选地，本发明上述鬼臼毒素醇质体的含醇量为20～50％，脂质含量为2～5％，载药量为0.1～1.0％，包封率为30～90％。

本发明上述鬼臼毒素醇质体可通过下述两种方法制备：

一、注入法：将鬼臼毒素与载药脂质材料置于密闭容器中，在磁力搅拌状态下加入乙醇使其溶解，恒速缓慢滴入2～5倍量的水继续恒速搅拌0.5～1h，于冰水浴中探头超声后过孔径为0.22～0.5μm的微孔滤膜，即得鬼臼毒素醇质体。

二、薄膜超声法：将鬼臼毒素与磷脂类溶于甲醇与氯仿的体积比为(3-5)：1的混合溶液中，溶解后加入茄型瓶中，在25～50℃下使用旋转蒸发仪减压蒸发除去有机溶剂，使脂质在器壁上形成均匀薄膜，加入一定体积的乙醇水溶液，旋转水合，与冰水浴中探头超声0.5～1h后过孔径为0.22～0.5μm的微孔滤膜，即得鬼臼毒素醇质体。

本发明鬼臼毒素醇质体性质稳定，可以按照常规方法将其制成贴剂、凝胶剂等多种外用剂型。

目前临床常用的0.5％鬼臼毒素酊剂含有60～80％的乙醇，高浓度的乙醇对皮肤有强烈的刺激作用，且用药面积过大会带来全身毒性，且临床实验证明该制剂由于不能作用到皮肤深部而极其容易复发。

随后的实施例将证明，本发明含鬼臼毒素醇质体的局部刺激性较小，与酊剂及脂质体相比增加了皮肤内的滞留量而减少了透过量，且醇质体与细胞膜具有良好的生物相容性，可以渗入细胞内部，这对降低疾病的复发具有重要的意义。

附图说明

图1是鬼臼毒素醇质体的脂质囊泡的电镜扫描图。

图2是鬼臼毒素醇质体的粒径分布图。

图3是鬼臼毒素醇质体与其他给药系统24h大鼠皮肤体外累积渗透量。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。

本发明以下实施例对制备得到的鬼臼毒素醇质体的粒径、包封率和载药量等指标采用以下措施进行如下评价和表征：

1、鬼臼毒素醇质体的透射电镜(TEM)照片

样品加适量乙醇水溶液稀释，滴加在覆盖碳膜的铜网上，用2.0％磷钨酸负染，于透射电镜下观察，放大10万倍拍摄透射电镜照片，如图1所示。

2、测定鬼臼毒素醇质体的粒径