[发明专利]一种内切-β-葡聚糖酶基因无效
| 申请号: | 201010104728.0 | 申请日: | 2010-01-29 |
| 公开(公告)号: | CN101870985A | 公开(公告)日: | 2010-10-27 |
| 发明(设计)人: | 金欣;杜风光;夏黎明 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
| 主分类号: | C12N15/56 | 分类号: | C12N15/56;C12N15/63;C12N1/15;C12R1/645;C12R1/885 |
| 代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
| 地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 聚糖 基因 | ||
1.一种内切-β-葡聚糖酶基因,其特征在于:碱基序列如SEQ ID NO:2所示。
2.一种包含权利要求1所述的内切-β-葡聚糖酶基因的内切-β-葡聚糖酶表达盒。
3.根据权利要求2所述的内切-β-葡聚糖酶表达盒,其特征在于:内切-β-葡聚糖酶表达盒的启动子和终止子分别为里氏木霉(Trichodermareesei)纤维二糖水解酶I基因的启动子和终止子。
4.一种包含权利要求1所述的内切-β-葡聚糖酶基因的重组载体。
5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于:含有潮霉素B磷酸转移酶表达盒,所述的潮霉素B磷酸转移酶表达盒由依次连接的构巢曲霉(Aspergillus nidulans)色氨酸合成基因的启动子和潮霉素B磷酸转移酶基因构成;所述的潮霉素B磷酸转移酶的碱基序列如SEQ ID NO:4所示。
6.一种含权利要求1所述的内切-β-葡聚糖酶基因的转化子。
7.根据权利要求6所述的转化子,其特征在于:宿主细胞为丝状真菌。
8.根据权利要求7所述的转化子,其特征在于:宿主细胞为里氏木霉。
9.根据权利要求8所述的转化子,通过如下方法制备:
(1)构建由启动子、信号肽、内切-β-葡聚糖酶基因和终止子依次连接构成的内切-β-葡聚糖酶表达盒;
(2)将潮霉素B磷酸转移酶表达盒与原始载体连接,制得重组载体;
(3)将步骤(1)制得的内切-β-葡聚糖酶表达盒整合到重组载体中;
(4)将步骤(3)制得的重组载体通过根瘤农杆菌介导转入里氏木霉。
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