[发明专利]同时检测传染性微生物的抗原及抗体的方法

权利要求书

1.一种体外检测生物样品中人类免疫缺陷病毒即HIV感染的方 法，包括同时检测生物样品中存在的所述HIV的至少一种抗原和针对所 述HIV的至少一种抗体，该方法包括：

a)使生物样品接触针对所述HIV的捕获抗体，和来源于所述HIV 的捕获抗原；

b)在允许形成抗原-抗体复合物的条件下温育该混合物；

c)显示形成的抗原-抗体复合物，任选地通过使用经标记的检测 抗体，和/或任选地还通过使用经标记的检测抗原，所述经标记的检测 抗体能够结合已被捕获的所述HIV的抗原，所述经标记的检测抗原能够 结合已被捕获的抗HIV抗体，

其中所述HIV的捕获抗原和/或经标记的检测抗原包含所述HIV的 抗原性片段，在该抗原性片段中至少一个表位已经被破坏；

并且其中捕获抗体和/或检测抗体识别已被捕获的抗原的完整的所 述至少一种表位；

d)捕获抗体/抗原复合物的存在和抗体/捕获抗原复合物的存在 表明具有HIV感染。

2.权利要求1的方法，其中HIV为HIV-1和/或HIV-2。

3.权利要求1或2的方法，其中捕获抗原包含HIV的gag蛋白的 抗原性片段，在该抗原性片段中至少一个表位位点已经被破坏。

4.权利要求1或2的方法，其中捕获抗原包含HIV的包膜蛋白的 抗原性片段。

5.权利要求1或2的方法，其中捕获抗原包含至少两个不同的已 经被破坏的表位位点。

6.权利要求1或2的方法，其中捕获抗原包含通过至少一个氨基 酸的置换、缺失或插入而被破坏的表位位点。

7.权利要求1或2的方法，其中所述捕获抗体和所述捕获抗原固 定于固相上。

8.权利要求1或2的方法，其中在抗原-抗体复合物形成之后向混 合物中添加检测抗体。

9.权利要求1或2的方法，其中检测抗体和/或检测抗原与捕获抗 体和捕获抗原同时接触生物样品。

10.权利要求1的检测方法，所述方法包括：

a)使该样品接触与固相结合的HIV捕获抗体和HIV捕获抗原；

b)在允许形成抗原-抗体复合物的条件下温育该混合物；

c)分离固相与液相；

d)使固相接触经标记的检测抗体和一种或多种经标记的抗免疫 球蛋白或抗同种型抗体，所述经标记的检测抗体能够结合已被捕获的 HIV抗原，所述经标记的抗免疫球蛋白或抗同种型抗体能够结合已被捕 获的抗HIV抗体，

用于捕获抗HIV抗体的抗原包含HIV gag蛋白的抗原性片段，在该 抗原性片段中至少一个表位已经被破坏，

并且捕获抗体和检测抗体各个识别已被捕获的衣壳抗原的完整的 所述至少一种表位。

11.权利要求10的方法，其中捕获抗体和检测抗体各个识别SEQ ID  NO：24中所示的序列QASQEVKNWMTETLL的表位。

12.权利要求10或11的方法，其中在至少一种非离子型去污剂的 存在下，使生物样品接触与固相结合的所述捕获抗体和所述捕获抗原。

13.权利要求12的方法，其中所述非离子型去污剂是NP40。

14.用于检测生物样品中人类免疫缺陷病毒即HIV感染的试剂盒， 其包含：

-捕获抗原或检测抗原，其包含HIV蛋白质的抗原性片段，所述 片段含有至少一个被破坏的表位，而同时保留结合生物样品中可能存在 的抗HIV抗体的能力，所述被破坏的表位在其结构内进行了修饰，以致 含有这种被破坏的表位的捕获抗原或检测抗原不能结合针对相应于所 述被破坏的表位的完整表位的捕获抗体或检测抗体；

-针对所述HIV蛋白质的相应于所述被破坏的表位的完整表位的 所述捕获抗体或检测抗体。

15.权利要求14的试剂盒，其中HIV为HIV-1和/或HIV-2。